1997 Fiscal Year Annual Research Report

動物ミトコンドリアの翻訳システムの分子機構

Research Project

Project/Area Number	08408025
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	渡辺公綱東京大学, 大学院・工学系研究科, 教授 (00134502)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	新田至東京大学, 大学院・工学系研究科, 助手 (30272404) 河合剛太千葉工業大学, 工学部, 講師 (70211860) 上田卓也東京大学, 大学院・工学系研究科, 助教授 (80184927)
Keywords	動物ミトコンドリア / イン-ビトロ翻訳系 / 非普遍暗号 / tRNA / Wobble則 / 修飾塩基 / ホルミルトランスフェラーゼ / セリル-tRNAシンテターゼ
Research Abstract	本研究の目的は、(1)動物ミトコンドリアtRNAの構造解析と、(2)ウシ・ミトコンドリアのイン・ビトロ翻訳系の構築によるこれらのtRNAの翻訳活性の検証、を通して動物ミトコンドリアの翻訳システムの分子機構を解明することである。昨年度にも報告したが、当初の目的は9割方達成し、さらなる展開を計っている。 (1)非普遍暗号の解読機構:ヒトデのtRNA^<Asn>でアンチコドン2文字目に修飾塩基シュウドウリジン(Ψ)を発見し、これがアンチコドン1字目のGがコドン3字目のAおよびGと対合するのを可能にしていることを、アンチコドンGΨUをもつ人工合成tRNA^<Asn>を用いて大腸菌のイン・ビトロ翻訳系で証明した。これによってほぼ動物ミトコンドリアにおけるWobble則を確立できたと考えている。 (2)Met-tRNAホルミルトランスフェラーゼ:本酵素遺伝子のクローニングに成功し、その大量発現系を構築し、酵素を大量に調製し、結晶化によるX線結晶解析を行いつつある。本酵素はウシ・ミトコンドリア由来のMet-tRNAだけでなく、大腸菌由来のMet-tRNA^<Met>f、Met-tRNA^<Met>mもホルミル化可能であり、ミトコンドリアにはtRNA^<Met>がただ1種類しか存在しないことと関連づけられる可能性が出てきた。 (3)セリル-tRNAシンテターゼ(SerRS)の調製とクローニング:SerRSは2種類の全く異なったtRNA^<Ser>にSerを結合させることができる。その認識機構を解明する目的で、本酵素遺伝子のクローニングを行い、大量発現系を構築している。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] S.Matsuyama et al.: "A Novcl wobble rule found in starfish nifochondria" J.Biol.Chem.273・6. 3363-3368 (1998)
[Publications] Y.Watanabe et al.: "CDNA seguence of a transladinal eborgstion factor Ts humologue franc elegans : mitochondrial spacific feaornes" Biochim,Biodhys,Acfa. 1353. 7-12 (1997)
[Publications] I.Hayashi et al.: "Expression of bocine mitochondrial tRNA^<Ser> acu derivatives in Eschevi chia cali" Nucleic Acids Res. 25.17. 3503-3507 (1997)
[Publications] S.Yoshizawa et al: "GNA trinucleoride loop structures producing Extra-or bnarily stable DNA minihairpins" Biochemistry. 36・16. 4761-4767 (1997)
[Publications] I.Hayashi et al: "Asiignmend of Dmino profon signals of G-C base pais and magnesium ion binding" J.Biochem.121・6. 1115-1122 (1997)
[Publications] K.Tomita et al: "Two nucleoti des S'-edjacent to the anticodon of rot cytoplasmic tRNA^<Asp> Cre not sdifed" Biochimie. 78. 1001-1006 (1996)
[Publications] 大澤著, 渡辺他訳: "違伝暗号の起渡と進化" 共立出版, 252 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

動物ミトコンドリアの翻訳システムの分子機構

Principal Investigator

渡辺 公綱 東京大学, 大学院・工学系研究科, 教授 (00134502)

Research Products

[Publications] S.Matsuyama et al.: "A Novcl wobble rule found in starfish nifochondria" J.Biol.Chem.273・6. 3363-3368 (1998)

[Publications] Y.Watanabe et al.: "CDNA seguence of a transladinal eborgstion factor Ts humologue franc elegans : mitochondrial spacific feaornes" Biochim,Biodhys,Acfa. 1353. 7-12 (1997)

[Publications] I.Hayashi et al.: "Expression of bocine mitochondrial tRNA^<Ser> acu derivatives in Eschevi chia cali" Nucleic Acids Res. 25.17. 3503-3507 (1997)

[Publications] S.Yoshizawa et al: "GNA trinucleoride loop structures producing Extra-or bnarily stable DNA minihairpins" Biochemistry. 36・16. 4761-4767 (1997)

[Publications] I.Hayashi et al: "Asiignmend of Dmino profon signals of G-C base pais and magnesium ion binding" J.Biochem.121・6. 1115-1122 (1997)

[Publications] K.Tomita et al: "Two nucleoti des S'-edjacent to the anticodon of rot cytoplasmic tRNA^<Asp> Cre not sdifed" Biochimie. 78. 1001-1006 (1996)

[Publications] 大澤著, 渡辺他訳: "違伝暗号の起渡と進化" 共立出版, 252 (1997)

渡辺公綱東京大学, 大学院・工学系研究科, 教授 (00134502)