1996 Fiscal Year Annual Research Report
カイコ消化管でのアポトーシス現象に関わる27Kヌクレアーゼの機能
| Project/Area Number |
08456036
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
|
| Research Institution | Kyoto Institute of Technology |
|---|
Principal Investigator |
古澤 寿治 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (70127166)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小谷 英治 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 助手 (10273541)
森 肇 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 助教授 (80201812)
杉村 順夫 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 助教授 (20273542)
小田 耕平 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (50081584)
|
|---|
| Keywords | カイコ消化管 / アポトーシス / プロテアーゼ / ヌクレアーゼ / プログラム細胞死 |
|---|
| Research Abstract |
カイコ消化液の27K蛋白質画分にはヌクレアーゼ活性があることを明らかにしてきたが、更に、この画分にはプロテアーゼ活性が存在することを確認した。5齡幼虫から蛹に至る変態プロセスでの本プロテアーゼの生理機能を明らかにするため、遺伝子解析および転写・翻訳レベルでの発現パターンを明らかにした。
1.27K蛋白質のプロテアーゼ活性はpH=11付近に至適があり、塩基性単一ポリペプチド(pI=11)から構成されていた。
2.27K蛋白質コード領域から推定されるアミノ酸配列には、セリンプロテアーゼ共通の活性触媒残基およびキモトリプシン型の基質特異性残基が保存されていた。
3.27K蛋白質遺伝子の上流域には、哺乳類のアポトーシス誘導蛋白質(poly a binding protein:PABP)と相同性の高いPABPホモローグ蛋白質遺伝子がコードされていた。
4.27K蛋白質m-RNAとその翻訳産物の消長パターンから、次のことが確認された。(1)27K蛋白質は分泌シグナルを含む前駆体蛋白質(30K)として中腸皮膜細胞で合成され、盛食期には、前駆体蛋白は速やかにプロセッシングを受け、多量の27K蛋白質が消化液中に分泌される、(2)一方、熟蚕期以降の中腸皮膜細胞および前蛹期の脱落細胞中には、前駆体蛋白が蓄積する。
これらの知見は、27K蛋白質およびその前駆体蛋白質が変態に伴う中腸皮膜細胞のプログラム細胞死と関連していることを示唆している。
|
-
[Publications] T-N.Pham: "Expression of Bombyx family fungal proteinase inhibitor F from Bombyx mori by baculovirus vector" J.Biochem.119. 147-153 (1996)
-
[Publications] K'.Oda: "Cloning and expression of an isovaleryl pepstatin-insensitive carboxyl proteinase gene from Xanthomonas sp.T-22" J.Biochem.120. 564-572 (1996)
-
[Publications] M.Ito: "Substrate specificities of pepstatin-insenstive carboxyl proteinases from gram-negative bacteria" J.Biochem.120. 845-850 (1996)
