1997 Fiscal Year Annual Research Report
糸状菌における糖質関連酵素遺伝子群の発現制御に関する分子生物学的解析とその応用
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08456049
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| Research Institution | NAGOYA UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
塚越 規弘 名古屋大学, 農学部, 教授 (50115599)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
加藤 雅士 名古屋大学, 農学部, 助手 (70242849)
小林 哲夫 名古屋大学, 農学部, 助教授 (20170334)
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| Keywords | Aspergillus / タカアミラーゼA / キシラナーゼ / セルラーゼ / 転写因子 / AnCP / CDAAT / HAP複合体 |
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| Research Abstract |
これまでにAspergillus oryzae JCM02239から単離した典型的な誘導酵素であるタカアミラーゼA(TAA)遺伝子の構造特性を明らかにし、Aspergillus nidulansを宿主としてTAA遺伝子の発現特性について解析してきた。すなわち、誘導条件下ではプロモーター領域に存在するシスエレメントCCAAT配列が高発現に不可欠であり、CAAT配列と特異的に結合する転写促進因子AnCPにより、TAA遺伝子発現が高進することを示した。
本研究は再生産利用可能な糖質資源の高効率利用を目標に、これまでのタカアミラーゼA遺伝子に関する解析成果を更に分子レベルで詳細に解析するとともに、セルラーゼ、キシラナーゼ等糖質資化に関わる糖質関連酵素群の遺伝子発現特性ならびに制御系のネットワークを分子レベルで解明し、広範な多糖類を気質とした糸状菌の高度利用に新局面を拓く事を目的とした。実際には、アミラーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ遺伝子群の誘導発現機構をタカアミラーゼAを中心して解析するとともに、転写促進因子AnCP(CCAAT結合因子)の単離とAnCP遺伝子の分離を試み、CAAT配列結合因子の一成分HAPCを分子生物学的に解析した。発現制御に関しては、カタボライト抑制因子CREAのタカアミラーゼA遺伝子プロモーター上で結合特性について解析した。また、発現誘導に関してはシスエレメント(SRE)の特定と結合因子SREBの存在を示唆した。セルラーゼについてはA.nidulansよりCMCで誘導されるeglA遺伝子を分離し、塩基配列を決定した。キシラナーゼについてはC.gracileに由来するcgxA遺伝子の発現を抑制するシスエレメントならびに抑制因子の存在を示し、また、A.oryzaeに由来するxynFl遺伝子のプロモーター領域の解析を行った。
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[Publications] Masashi Kato: "The Aspergillus nidusans CCAAT-biding factor,AnCPl,AnCF,is a heteromeric protein analogous to the HAP complex of socchromyces cerevisiae" Mol.Gen.Genet.in press. (1998)
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[Publications] Msashi Kato: "An Aspergillus nidulans nuckar protein. AnCP,involved in enhancement of takaamylose Asone expression binds to the CCAAT.contoining taaG2,and S and gat A promoters" Mol.Gen.Genet.254. 119-126 (1997)
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[Publications] Masahi Kato: "Seguence.specific binding sites in the Taka-amylase AG2 promoter for the CreA repressor mediating carbon catabolite repression" Biosci.Biotech.Biocchem.60. 1776-1779 (1996)
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[Publications] Noriyuki Kitamoto: "Molecular cloning,purificotion and characterzation of two endo-1,4-gluconases from Aspergillus oryzae KBN616" Appl.Microbiol.Biotechnol.46. 538-544 (1996)
