1997 Fiscal Year Annual Research Report
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08456053
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| Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
木村 光 京都大学, 食糧科学研究所, 教授 (80026541)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
井沢 真吾 京都大学, 食糧科学研究所, 助手 (10273517)
井上 善晴 京都大学, 食糧科学研究所, 助教授 (70203263)
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| Keywords | Saccharomyces cerevisiae / Hansenula mrakii / OSR1 / DOG2 / GSH2 |
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| Research Abstract |
酸化的ストレス適応機構において重要な抗酸化酵素であると考えられるglutathione peroxidase(GPx)について解析を行った。これまで、微生物はシトクロムcペロキシダーゼを持ことからGPxを持たないと考えられてきたが、本申請者らは酵母Hansenula mrakiiがGPxを持つことを既に報告し、今回本酵素遺伝子のクローニングを試みた。その結果、PGL1遺伝子を単離し解析を行った。さらにSaccharomyces cerevisiaeについてもゲノムデータベースの解析より3つのGPxホモログ(YKL026c,YBR244w,YIR037w)遺伝子について破壊株を構築しストレス適応応答での役割と発現制御機構について解析を進めた。また酸化的ストレス適応応答における、抗酸化性物質グルタチオンの再還元系の生理的意義を種々の遺伝子破壊株を用いて検討し、原核細胞の大腸菌、下等真核生物である酵母、及び哺乳類の三者の間でストレス応答における役割に相違があることを明らかにした。また、細胞内グルタチオン含量の制御に関与するOSR1/ZRC1遺伝子の発現制御機構の解析を行った。OSR1/ZRC1遺伝子の発現は金属制限条件下で誘導され、その誘導には亜鉛代謝にかかわる転写因子Zaplpの影響下にあることを明らかにした。過酸化脂質についても、Snyder-library法を用いてtert-butyl hydroperoxideによって発現誘導される遺伝子のスクリーニングを行い、2-deoxyglucose-6-phosphate phosphataseをコードするDOG2遺伝子が過酸化脂質応答性であることを明らかにした。この遺伝子は過酸化脂質以外にもグルコース飢餓や浸透圧ストレスによっても誘導され、その発現はHOG-MAP kinase cascadeにより制御されることを解明した。
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[Publications] Y.Inoue et al: "Oxidative stress response in yeast a new type of glutathione peroxiclase from tlansenula mrakii" Recent Reserch Developments in Agricultural and Biological Chemistry. (印刷中). (1998)
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[Publications] Y.Inoue et al.: "Molecular identification of glutathione synthe tase (GSH2) from Saccharomyces cerevisiae" Biochim.Biophys.Acta. 1395(3). 315-320 (1998)
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[Publications] S.Izawa et.al.: "Importance of glucose-6-phosphate dehydrogenase in the adaptive response to hydrogen peroxide in Saccharomyces cerevisiae" Biochem.J. 330(2). 811-817 (1998)
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[Publications] 井沢真吾, 木村 光: "酵母の各種遺伝子破壊株を用いた酸化的ストレス応答の研究" 京都大学食糧科学研究所報告. 60. 131-132 (1997)
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[Publications] Y.Inoue et al.: "Expression of the glyoxalase I gene of Saccharomyces cerevisiae is regulated by high Osmolarity glycerol mitogen-activated protein kinase pathway in osmotic" J.Biol.Chem.273(5). 2977-2983 (1998)
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[Publications] 井上善晴: "酵母のMAPキナーゼカスケードによるストレス環境下での遺伝子発現制御DOG2とGLO1遺伝子を例に" 京都大学食糧科学研究所報告. 61(印刷中). (1998)
