1996 Fiscal Year Annual Research Report
リンパ系機能とリンパ管内及細胞との相互作用に関する細胞生理学的研究
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08457009
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
大橋 俊夫 信州大学, 医学部, 教授 (80020832)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
横山 伸 信州大学, 医学部, 助手
王 海じぇ 信州大学, 医学部, 助手
伊古美 文隆 信州大学, 医学部, 講師 (50262704)
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| Keywords | 浸出マクロファージ / モノクロナールED1抗体 / リンパ管平滑筋 / 弛緩反応 / Bacterial LPS / nitric oxide(NO) / 血管拡張性プロスタグランジン(PG_S) / NOとPG_sの共分泌 |
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| Research Abstract |
[I]マクロファージ培養システムの確立
リンパ循環の生理学と免疫学の連繋を目指してマクロファージの動態とその病態生理学的挙動を解析する免疫生理学の新分野を開拓するためにラットマクロファージの培養系を確立した。免疫学的生物特性を均一に保持するために脾臓由来のマクロファージが一般に汎用されているが、私共は血管外に遊走してきたマクロファージの膜特性や生物学的活性がどのように変化しているかを評価するために、刺激物質に反応して組織間隙に遊走してきた浸出マクロファージの培養系を確立した。すなわち、ラットの腹腔中に4%thioglycollate 10mlを注入し、4日後に腹腔に浸出してきたマクロファージを採取した。採取した細胞は10%ウシ胎児血清を含むRPMI 1640培養液にて12時間〜48時間培養することが出来た。浸出マクロファージであることはマクロファージマーカーのED1モノクロナール抗体分布が細胞質内に限局していることから確認した。
[II]培養マクロファージ由来生理活性物質のリンパ管平滑筋への作用を評価
摘出したイヌ胸管より作製したバイオアッセイ標本を用いてbacterial lipopolysaccharide(LPS)で活性化させたマクロファージより産生・放出される生理活性物質の特性を解析した。すなわち、内皮健常あるいは剥離いずれのバイオアッセイ標本もマクロファージの培養上清によって顕著な弛緩反応が誘起された。この弛緩反応はNO合成阻害薬あるいはcycloxygenase阻害薬のいずれによっても有意に抑制された。さらにdexamethasoneやcyclohexamideの存在下で培養したマクロファージの培養上清はきわめてわずかな弛緩反応しか誘起しなかった。これらの結果から、LPSで刺激したラットマクロファージは一酸化窒素と血管拡張性プロスタグランジンを同時に放出してリンパ管平滑筋を弛緩させていることが判明した。
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[Publications] Fukaya,Y.Ohhashi,T.: "Acetylcholine-and How-induced production and release of nitrlc oxide in arterial and renons endothelial cells" Am,J.Physiol.270. H99-H106 (1996)
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[Publications] Ikomi,F.et al.: "Lymph pump mechanics in rabbit hird leg." Am.J.Physiol.271. H173-H183 (1996)
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[Publications] Yokoyama,S.et al.: "Effects of bradykinin on lymphatic pumping in rat mesentery" Am.J.Physiol.270. G752-G756 (1996)
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[Publications] Yokoyama,S.et al.: "Hypoxia-reoxygenation impairs endothdium-dependent relaxation in isdated rat aorta" Am.J.Physiol. 270. R1126-R1131 (1996)
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[Publications] Ohigashi,Y.et al.: "Effects of 5-hydroxy tryptamine and actenosine on the canine isolated cerebral resistance vessels" Angiology. (印刷中). (1997)
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[Publications] Wang,H.J.: "Activated macrophages-mediated endogenous prostaglandins and nitric oxide-dependent relaxation of Lymphatic smooth muscles" Jpn,J.Physiol.(印刷中). (1997)
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[Publications] Ohhashi,T.et al.: "Proceedings of 6th World Congress for Microcr culation (Monduzzi Editor,Italy)" Messmer,K.& Kubler,W.M., 1010 (1996)
