1996 Fiscal Year Annual Research Report
炎症性・増殖性皮膚疾患における各種デスモソーム構成蛋白の関与の分子生物学的検討
Project/Area Number |
08457236
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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Research Institution | Kurume University |
Principal Investigator |
橋本 隆 久留米大学, 医学部, 教授 (20129597)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西川 武二 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579)
宮里 稔 久留米大学, 医学部, 講師 (50182001)
森 理 久留米大学, 医学部, 助教授 (10175630)
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Keywords | デスモソーム / 炎症 / 増殖 / 表皮 / 分子生物学 / デスモヨ-キン / デスモコリン / 尋常性乾癬 |
Research Abstract |
まずデスモヨ-キン(DY)の細胞膜および核内への移行に関する分子内部位を明らかにする目的で、そのN末端・中央部・C末端部を発現するconstractを作成した。すなわち、それぞれの部位のcDNAを有核細胞発現系ベクター(pcDNAl/Amp)に組み込み、さらにその末端部にタンデムに7回並ぶc-mycの配列を組み込んだ。これらのconstractをOOS細胞にtransfectし、それぞれの部分蛋白の細胞内での分布をc-myc配列特異的抗体を用いた蛍光抗体法により検討した。しかしながらOOS細胞ではDYは細胞質内に分布しの細胞膜および核内への移行は見られなかった。今後正常ケラチノサイトを用いて同様の検索を行う予定である。また、各種デスモソーム蛋白の各種皮膚疾患の発症における関与の可能性について検討する目的で、尋常性乾癬、有棘細胞癌、扁平苔癬などの異常増殖を伴う多くの皮膚疾患の病変皮膚を用いて、各種デスモソーム蛋白の発現をそれぞれの特異的抗体による蛍光抗体法ないし酵素抗体法による免疫組織学的手法により蛋白レベルで検索した。その結果からDY・Dsc3が、これらの皮膚疾患において重要な役割を果たしている可能性が示唆された。さらに、蛋白レベルでの結果を確認するために、in situ hybridizationによる種々のデスモソーム蛋白のmRNAレベルでの検討した。すなわち、DY・Dsc3の最もホモロジーの低い部分をpSPT18ベクターに組込み、デゴキシゲニン結合プローブを作成した。このプローブを用いたin situ hybridizationによりそのmRNAの発現を検討した。その結果、各種疾患患者病変皮膚においてDY・Dsc3はmRNAレベルでも増加していた。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Chen K-R et al: "Coexistence of psoriasis and an unusual IgG-mediated subepidermal bullous dermatosis : identification of a novel 200-kDa lower lamina lucida target antigen" British Journal of Dermatology. 134. 340-346 (1996)
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[Publications] Zillikens D et al: "Anovel IgG-mediated subepidermal blistering disease with autoantibodies against a 200-kD antigen of the basement membrane zone" Journal of Investigative Dermatology. 106. 465-470 (1996)
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[Publications] Ishiko A et al: "97-kD linear IgA bullous dermatosis (LAD) antigen localizes to the lamina lucida of the epidermal basement membrane" Journal of Investigative Dermatology. 106. 739-743 (1996)
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[Publications] Hashimoto T et al: "Studies of autoantigens recognized by IgA anti-keratinocyte cell surface antibodies" Journal of Dermatological Science. 12. 10-17 (1996)
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[Publications] Hashimoto T et al: "Specific detection of anti-cell surface antibodies in herpes gestationis" Experimental Dermatology. 5. 96-101 (1996)
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[Publications] Hashimoto T et al: "IgA anti-keratinocyte cell sruface autoantibodies from two types of intercellular IgA vesiculopustualr dermatosis recognize distinct isoforms of desmocollin" Archives of Dermatological Research. 288. 447-452 (1996)