BBB(血液脳関門)モデルの開発とBBB成立機序解明に関する研究

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08457360
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 竹内 茂和 新潟大学, 脳研究所, 助教授 (50143772)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 森 宏 新潟大学, 脳研究所, 助手 (70291359) ; 森井 研 新潟大学, 医学部附属病院, 助手 (20230089) ; 阿部 博史 新潟大学, 医学部附属病院, 助手 (60240769)
• Keywords: 内皮細胞 / アストロサイト / 血液脳関門

Research Abstract

フィッシャー成熟ラットの脳微小血管から分離培養した内皮細胞(10-20代)をFalcon double chamber systemのフィルター上面に培養し、同じくフィッシャーの新生児ラットの脳から分離したアストロサイトを下面に培養した。タイプ1コラーゲンでフィルター上面をコーティングし、さらにファイブロネクチンで処理することにより、内皮細胞の増殖と分化を促進させた。
両者の培養細胞を表裏に培養したフィルターは、培養の経過とともに膜電気抵抗が増大した。物質透過を検討すると、FITC-アルブミンとデキストランの透過性は培養の経過とともに減少した。透過型電子顕微鏡による観察では、内皮細胞間の接合はよりtightになり、一部にtight junctionが誘導された。内皮細胞のγ-GTP含有量を測定すると、経時的に増大した。
次に、上記の培養系に血管形成した内皮細胞を維持した培養上清を加え、物質透過性の変化、tight junctionの誘導そしてγ-GTP含有量の変化を検討した。結果は、コントロール群と差が認められず、血液脳関門の形成は促進されなかった。
すなわち、アストロサイトを活性化させる因子(内皮細胞への遊走と接着を促進させる因子)は、血液脳関門の形成に関与しないことが示唆された。