1997 Fiscal Year Annual Research Report
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08457479
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
栗栖 浩二郎 大阪大学, 歯学部, 教授 (50028346)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田畑 純 大阪大学, 歯学部, 助手 (20243248)
加藤 穣慈 大阪大学, 歯学部, 助手 (90243245)
岩本 容泰 大阪大学, 歯学部, 講師 (30223431)
脇坂 聡 大阪大学, 歯学部, 助教授 (40158598)
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| Keywords | 歯胚 / PTHrP / 器官培養 / マウス / 形態形成 / 発生 / 組織分化 / アンチセンスオリゴDNA |
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| Research Abstract |
本年度は、歯胚発生におけるPTHrPの役割をさらに詳細に解析することを目的として、培養マウス歯胚を用いて以下の実験を行った。胎齢14日のマウス胎仔より蕾状期の歯胚を摘出し、Trowellの系で無血清BGJb培地を用いて培養した。実験群の培地には、PTHrPのmRNAに対するアンチセンスオリゴDNA20μMを添加し、2日目毎に培地と共に交換した。その結果、培養5〜6日目より歯乳頭への周囲の骨組織の侵入が始まり、培養10〜17日目ではエナメル器にも骨組織が侵入して歯胚が二分され、さらに培養を続けると歯胚は完全に破壊された。しかし、オリゴ無添加、センスオリゴ添加、アンチセンスオリゴ+組替えPTHrP添加の対照群ではいずれも正常な歯胚が形成された。また、PTHrP受容体のmRNAに対するアンチセンスオリゴ添加群では、PTHrPのアンチセンスオリゴ添加群と同様に、歯乳頭への骨組織の侵入が観察された。各群におけるこれらの所見には高い再現性が認められた。以上の結果から、PTHrPは周囲の骨組織の侵入から歯胚を防御する機構に関与しているものと考えられる。つぎに、アンチセンスオリゴ添加群における骨組織の歯胚への侵入の機構を解明するため、破骨細胞の酒石酸耐性酸フォスファターゼ(TRAP)活性に対するアンチセンスオリゴの影響を調べた。その結果、アンチセンスオリゴ添加群では、対照群に比べてTRAP活性が抑制されていることが分かった。従って、アンチセンスオリゴ処理によって、破骨細胞の活性が抑制される為、歯胚への周囲からの骨組織の侵入が容易になるものと考えられる。
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Research Products
(11 results)
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[Publications] J.G.Liu: "Developmental role of PTHrP in the murine molars." Europ.J.Oral Sci.(in press). (1998)
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[Publications] Y.Miyawaki: "Calbindin D28k-like immuno-reactivity in the developing and degenerating circumvallate papilla of the rat." Cell Tssue Res.(in press). (1998)
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[Publications] S.H.Youn: "Growth-associated protein-43 (GAP 43) in the regenerating periodontal Ruffini endings of the rat incisor following injury of the inferior alveolar nerve." Brain Res.(in press). (1998)
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[Publications] M.Enomoto-Iwamoto: "Bone morphogenetic protein signaling is required for maintenance of differentiating activity,cessation of proliferation and terminal differentiation of chondrocytes." J.Cell Biol.40. 409-418 (1998)
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[Publications] K.Kurisu: "Human genes for dental anomalies." Oral Dis.3. 223-228 (1998)
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[Publications] T.Inai: "Immunohistochemical localization of connexin 43 in the enamel organ of the rat upper incisor during ameloblast development." Arch.Histol.Cytol.60. 297-306 (1997)
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[Publications] N.Kinto: "Fibroblasts expressing sonic hedgehog induce osteoblast differentiation and proliferation of chondrocytes." FEBS Lett.404. 319-323 (1997)
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[Publications] T.Nakamura: "Induction of osteogenic differentiation by hedgehog proteins." Biochem.Biophys.Res.Commun.237. 465-469 (1997)
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[Publications] M.Enomoto-Iwamoto: "Involvement of α5β1 integrin in matrix interactions and proliferation of chondrocytes." J.Bone Miner.Res.(in press). (1997)
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[Publications] Y.Miyawaki: "Calbindin D28k-like immunoreactive nerve fibers in the predentin of rat molar teeth." Archs.oral Biol.42. 773-777 (1997)
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[Publications] S.H.Youn: "Regeneration of periodontal primary afferents of the rat incisor following injuru of the inferior alveolar nerve with special reference to neuropeptide Y-like immunoreactive primary afferents." Brain Res.752. 161-169 (1997)
