1997 Fiscal Year Annual Research Report
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08457481
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| Research Institution | HIROSHIMA UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
杉中 秀壽 広島大学, 歯学部, 教授 (70028736)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤原 環 広島大学, 歯学部, 助手 (90274092)
菅井 基行 広島大学, 歯学部, 助教授 (10201568)
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| Keywords | 溶菌酵素 / オートリシン / ATL / 黄色ブドウ球菌 |
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| Research Abstract |
本研究の目的は黄色ブドウ球菌溶菌酵素の活性制御機構であった。私供は黄色ブドウ球菌を化学合成培地で培養し、放射性メチオニンで標識したのち未標識のメチオニンを加えるチェ-ス実験を行った。その結果、抗ATL血清で免疫沈降される蛋白質は138kDaから115kDa、85kDa、62kDa、51kDaと分子量の小さなものに変化していった。このことからatl遺伝子産物は分泌された後にプロセシングを受けることが明らかとなった。また菌体に存在するatl遺伝子産物を精製し、その酵素活性を上清より精製したものと比較検討した。その結果、菌体由来の62kDa、51kDa蛋白質は上清由来の62kDa N-acetyl muramyl L-alanine amidase(amidase)、51kDa endo-beta-N-acetylglucosaminidase(glucosaminidase)であることが明らかになった。さらにatl遺伝子産物に対する抗血清を用いた免疫電子顕微鏡観察によってatl遺伝子産物は高塩濃度3M LiCl処理によって菌体から遊離するものと遊離しないものの2種に分けられ、遊離するものに成熟型の62kDa amidase、51kDa glucosaminidaseが多く、遊離しないものに高分子量138kDaのものが多いことが明らかとなった。このことからatl遺伝子産物は分泌されたのち、あるいは分泌途中では他の因子と強固に結合しており、その後プロセシングを受けると遊離型になって上清中に放出されることが示唆された。
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[Publications] M.Shigeta: "Effect of the growth rate of Pseudomonas aeruginosa biofilms on the susceptibility to antimicrobial agents." Chemotherapy. 43. 137-141 (1997)
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[Publications] M.Shigeta: "Permeabilities of antimicrobial agents through Pseudomonas aeruginosa biofilms:simple method" Chemotherapy. 43. 340-345 (1997)
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[Publications] M.Sugai: "Purification and molecular characterization of glycylglycine endopeptidase produced by Staphylococcus capitis EPK1." J.Bacteriol.179. 1193-1202 (1997)
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[Publications] H.Komatsuzawa: "Subcellular localization of the major autolysins,ATL and its processed proteins in Staphylococcus aureus." Microbiol.Immunol.41. 469-479 (1997)
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[Publications] M.Sugai: "Localized perforation of the cell wall by a major autolysin:atl gene products and the onset of penicillin-induced lysis of Staphylococcus aureus." J.Bacteriol.179. 2958-2962 (1997)
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[Publications] J.Suzuki: "Effects of various types of Triton X on the susceptibilities of methicillin-resistant staphylococci to oxacillin." FEMS Microbiol.Lett.153. 327-331 (1997)
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[Publications] M.Sugai: "epr,which encodes glycylglycine endopeptidase resistance,is homologous to femAB and affects serine content of peptidoglycan cross bridges in Staphylococcus capitis and Staphylococcus aureus." J.Bacteriol.179. 4311-4318 (1997)
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[Publications] H.Komatsuzawa: "Cloning and characterization of the fmt gene which affects the methicillin resistance level and autolysis in the presence of Triton X-100 in methicillin-resistant Staphylococcus aureus." Antimicrob.Agents Chemother.41. 2355-2361 (1997)
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[Publications] J.Suzuki: "A long-term suvey of methicillin-resistant Staphylococcus aureus in the oral cavity of children." Microbiol.Immunol.41. 681-686 (1997)
