歯周病原性因子によるマクロファージのPGE_2産生と骨吸収

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08457496
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 坂本 亘 北海道大学, 歯学部, 助教授 (30001952)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 雨宮 璋 北海道大学, 歯学部, 教授 (80018415) ; 西方 真 北海道大学, 歯学部, 教務職員 (00150243)
• Keywords: 歯周病原性因子 / 44kDaタンパク質 / LPS / マクロファージ / PGE_2 / Porphyromonas gingivalis / COX-2 / tyrosine kinase

Research Abstract

歯周病の発症、進展と歯周病原性因子、マクロファージとの関連性を明らかにするために、歯周病原性因子(44kDaタンパク質、LPS)によるマクロファージのPGE_2産生とCOX-2発現の細胞内情報伝達系について研究した。歯周病原性因子の一つ、44kDaタンパク質はPorphyromonas gingivalis培養液より、Bio-Gel A-0.5m, DEAE-Sephacel, SP-Sepharose FF を用いて電気泳動的に単一な標品を得ることに成功した。そして44kDaタンパク質、LPS刺激によるマクロファージのPGE_2産生、COX-2発現について、Northern blot,Western blot,ならびにアラキドン酸よりPGE_2への酸素活性より調べたところ、次の結果が得られた。(1)Rat peritoneal macrophageによるPGE_2産生は無刺激では0.15±0.09ng/10^6cellsであったが、44kDaタンパク質(1μg/ml)では0.373±0.07ng/10^6cellsと増加した。しかし、その刺激効果はLPS(1.0μg/ml)の139.1±41.0ng/10^6cellsに比べて非常に弱いものであった。 (2)LPS刺激のCOX-2発現は濃度、時間に依存した。(3)LPS刺激のCOX-2発現に対して、protein kinase Cinhibitor(H-7)は抑制作用を示さなかったが、tyrosine kinase inhibitor(genistein)は濃度依存的に抑制した。 (4)LPS刺激によるマクロファージタンパク質のtyrosine リン酸化に対して、genistein は阻害作用を示した。従って、LPSによるマクロファージのPGE_2産生亢進は、tyrosine kinaseを介する細胞内情報伝達系のCOX-2誘導によるものであることが明らかになった。

Research Products

• [Publications] T. shimizu et al.: "Identification of macrophage migration inhibitory factor in human skin and its immunological localization" FEBS Lett.381. 199-202 (1996)
• [Publications] W. Sakamoto et al.: "Degradation of T-kininogen by cathepsin D and matrix metalloproteinase" Immunopharmacology. 32. 73-75 (1996)
• [Publications] W. Sakamoto et al.: "Effect vitamin E on expression of cyclooxygenase-2 in in lipopolysaccharide-stimulated rat macrophages" Biochim Biophys. Acta. 1304. 139-144 (1996)
• [Publications] 坂本 亘ら: "LPS刺激によるマクロファージのPGE_2産生とチロシンキナーゼについて" 歯科基誌(補). 68. 209- (1996)
• [Publications] 坂本 亘ら: "マクロファージのCyclooxygenase-2発現とビタミンE" 生化学. 38. 1025 (1996)