標的遺伝子組換えによる遺伝性アミロイドーシスの発症機構の解析と治療法の検討

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08457628
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: 山梨医科大学
• Principal Investigator: 前田 秀一郎 山梨医科大学, 医学部, 教授 (10117244)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 加藤 梧郎 山梨医科大学, 医学部, 助手 (60177441) ; 馬淵 正 山梨医科大学, 医学部, 助手 (80150308)
• Keywords: アミロイドーシス / トランスサイレチン / 疾患モデルマウス / 血清アミロイドP成分 / 標的遺伝子組換え / 胚幹細胞 / 家族性アミロイドポリニューロパチー / トランスジェニックマウス

Research Abstract

1,一対の血清アミロイドP成分(sap)遺伝子の双方に挿入変異をもつ無SAPマウス株と対照野生型マウスとにAAアミロイドーシスを惹起し、これらマウスでの脾AAアミロイドの沈着を経時的に比較解析して、SAPがAAアミロイドーシスの発症にどう関与するかを調べた。この結果、11日目では、野化型マウス14匹中7匹に、無SAPマウス19匹中3匹にAAアミロイドの沈着を認めた。以後、12日目では、野生型マウス12匹中10匹に、無SAPマウス18匹中11匹に沈着を認め、14日目では、野生型マウス30匹中25匹に、無SAPマウス37匹中28匹に、18日目では、野生型マウス31匹中26匹に、無SAPマウス28匹中25匹に、29日目では、野生型マウス9匹中8匹に、無SAPマウス8匹中7匹にAAアミロイドの沈着を認めた。この結果を統計的に解析し、無SAPマウスに比べ、野生型マウスがAAアミロイドを早期に沈着し易いという傾向が有意であることを確認した。英国のPepys博士らも、筆者らとは、独立に無SAPマウス株を作製し、同様の結果を報告している。この結果は、SAPがAAアミロイドの沈着を促進することを示唆している。今後このマウスを用いて、SAPが家族性アミロイドポリニューロパチー(Familial Amyloidotic Polyneuropathy;FAP)のアミロイド沈着にどう関与するかを明らかにする計画である。
2,FAPに近似した優れた疾患モデルマウスの確立を目指し、先に我々が開発した二段階組換え標的遺伝子組換え法を用いて、内在性のttr遺伝子の一方のアレルにFAPの原因となる点変異をもつ変異マウス株を作製した。今後、これらヘテロ接合体マウス株を多数そろえ、月齢をおって、アミロイド沈着の有無を解析する計画である。本法は、特定の遺伝子に目的の変異をもったマウスを作製するための、簡便で効率の良い方法として、種々の疾患モデルマウスの作製に広く応用可能と考えられる。

Research Products

• [Publications] Togashi S.et al.: "Serum amyloid P component enhances induction of murine amyloidosis." Lab Invest. 77(5). 525-531 (1997)
• [Publications] Takaoka Y.et al.: "Comparison of amyloid deposition in two lines of transgenic mouse that model familial amyloidotic polyneuropathy,type I." Transgenic Research. 6(4). 261-269 (1997)
• [Publications] Kohno K.et al.: "Analysis of amyloid deposition in a transgenic mouse model of homozygous familial amyloidotic polyneuropathy." Am J Path ol. 150(4). 1497-1508 (1997)
• [Publications] Kato G., Maeda S.: "High-level expression of human c-Src can cause a spherical morphology without loss of anchorage-dependent growth of NIH 3T3 cells." FEBS Lett. 411(2-3). 317-321 (1997)
• [Publications] 前田秀一郎: "代謝異常症のDNA診断と発症機序" 病理と臨床. 15(9). 762-770 (1997)
• [Publications] 前田秀一郎: "in Molecular Medicine 34(臨時増刊号)ノックアウトマウス・データブック,transthyretin." 中山書店(黒川 清・笹月健彦監修、野口 茂・平井久丸編集幹事)東京, 564 (1997)
• [Publications] Maeda S., Yamamura K.: "in Germfree Life and its Ramifications:Proceeding of XIIth International Symposium on Gnotobiology,Use of a transgenic mouse model of familial amyloidotic polyneuropathy to investigate the role of serum amuloid P compoent in amyloid deposition." XII ISG Publishing Committee(Hashimoto k.,Sakakibara B.,Tazume S.,Shimizu K.,eds.)新潟, 596 (1996)