1997 Fiscal Year Annual Research Report

全胚培養系を用いた分子および遺伝子抑制法による脳の発生の機序の解析

Research Project

Project/Area Number	08458261
Research Institution	KEIO UNIVERSITY
Principal Investigator	川野仁慶應義塾大学, 医学部, 講師 (20161341)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	武内恒成奈良先端科学技術大学院大学, 助手 (90206946) 大山恭司慶應義塾大学, 医学部, 助手 (00255423) 野上晴雄慶應義塾大学, 医学部, 講師 (30119838) 川村光毅慶應義塾大学, 医学部, 教授 (40048286)
Keywords	全胚培養 / マウス / 中脳 / 細胞移動 / 神経接着分子 / L1 / NCAM-H / アンチセンスDNA
Research Abstract	脳の形成プログラムの解明は遺伝子工学の進歩とともに飛躍的に進んでいるが、こと哺乳類の脳の発生に関しては、胎仔への外科的アプローチが容易でないため、授精卵レベルの遺伝子操作や組織培養に頼らざるを得ない状況である。この問題を解決するために、我々は今回、全胚培養法をもちいてマウス胎仔の脳内に遺伝子を直接的に導入することを考えた。そのような実験系を適応するため、まず、マウス脳の正常形成過程の分子メカニズムを、各種活性分子の免疫組織化学や蛍光標識法などの形態学的手法を用いて調べ、神経接着分子であるNCAM-H、L1、TAG-1、それに脳の発生過程に豊富に存在するコンドロイチン硫酸プロテオグリカンであるニューロカンとフォスファカンが、発生過程の中脳や間脳視床下部でニューロンの移動と定着に重要な役割を果たすことを明らかにしてきた(川野、大山、湯浅、川村、西村書店、1997;Ohyama,Kawano,Asou,Fukuda,Oohira,Uyemura,Kawamura,Dev.Brain Res.1998 印刷中;川野ら、神経内分泌学会、1997年11月発表済み)。これらの観察結果をもとにして、本研究では、二宮(1992)によって開発された全胚培養法をもちいて胎生10日のマウス脳室内微量注入によって、分子機能や遺伝子発現を操作することで実験的に大脳皮質の形成メカニズムを調べることを試みた。その結果、子宮外手術によってマウス胎仔脳室内に各種の酵素、抗体、oligoDNAなどを注入し、数日間母体内で生存させることに成功した。本研究の成果は、今後、特定のDNAを脳内に導入することによる、遺伝子の発現増強あるいは発現抑制を可能にするものであり、脳の発生過程における各種遺伝子の機能を特定する方法として、その有効性が注目される。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Ikawa H,et al.: "Impaired expression of neural cell adhesion molecule L1 in the extrinsic nerve fibers in Hirschsprung's disease." J.Ped.Surg.32. 542-545 (1997)
[Publications] Fukuda T,et al.: "Immunohistochemical localization of neuorocan and L1 in the formation of thalamocortical pathway of developing rats." J.Comp.Neurol.382. 141-152 (1997)
[Publications] Ohyama K,et al.: "Localization of extracellular matrix molecules,integrins and their regulators,TGFβs,is correlated with axon pathfinding in the spinal cord of normal and Danforth's short tail mice." Dev.Brain Res.103. 143-154 (1997)
[Publications] Kawano H,et al.: "Regenerating axons of the paraventriculo-neurohypophysial tract invaded the scar tissue that expresses extracellular matrix molecules." J.Brain Sci.(in press). (1998)
[Publications] Ohyama K,et al.: "Coordinat expression of L1 and 6B4 proteoglycan/phosphacan correlated with the migration of mesencephalic dopaminergic neurons in mice." Dev.Brain Res.(in press). (1998)
[Publications] Yamamoto A,et al.: "Deficiency in protein L-isoaspartyl methyltransferase results in a fetal progressive epilepcy." J.Neurosci.(in press). (1998)
[Publications] 川野仁、ら: "-神経組織の再生と機能再建-基礎と臨床(中脳ドーパミンニューロンの移動と接着因子)" 西村書店, 17 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

全胚培養系を用いた分子および遺伝子抑制法による脳の発生の機序の解析

Principal Investigator

川野 仁 慶應義塾大学, 医学部, 講師 (20161341)

Research Products

[Publications] Ikawa H,et al.: "Impaired expression of neural cell adhesion molecule L1 in the extrinsic nerve fibers in Hirschsprung's disease." J.Ped.Surg.32. 542-545 (1997)

[Publications] Fukuda T,et al.: "Immunohistochemical localization of neuorocan and L1 in the formation of thalamocortical pathway of developing rats." J.Comp.Neurol.382. 141-152 (1997)

[Publications] Ohyama K,et al.: "Localization of extracellular matrix molecules,integrins and their regulators,TGFβs,is correlated with axon pathfinding in the spinal cord of normal and Danforth's short tail mice." Dev.Brain Res.103. 143-154 (1997)

[Publications] Kawano H,et al.: "Regenerating axons of the paraventriculo-neurohypophysial tract invaded the scar tissue that expresses extracellular matrix molecules." J.Brain Sci.(in press). (1998)

[Publications] Ohyama K,et al.: "Coordinat expression of L1 and 6B4 proteoglycan/phosphacan correlated with the migration of mesencephalic dopaminergic neurons in mice." Dev.Brain Res.(in press). (1998)

[Publications] Yamamoto A,et al.: "Deficiency in protein L-isoaspartyl methyltransferase results in a fetal progressive epilepcy." J.Neurosci.(in press). (1998)

[Publications] 川野仁、ら: "-神経組織の再生と機能再建-基礎と臨床(中脳ドーパミンニューロンの移動と接着因子)" 西村書店, 17 (1997)

川野仁慶應義塾大学, 医学部, 講師 (20161341)