3次元視システムによる遺伝子組み換えミニブタ受精卵作出システムの開発

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08508003
• Research Institution: NATIONAL CARDIOVASCULAR CENTER RESEARCH INSTITUTE
• Principal Investigator: 辻 隆之 国立循環器病センター研究所, 実験治療開発部, 部長 (00075764)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 土肥 健純 東京大学, 工学部精密機械工学科, 教授 (40130299) ; 安水 洸彦 山梨医科大学, 産婦人科, 助教授 (80107705) ; 佐田 正晴 国立循環器病センター研究所, 実験治療開発部, 室長 (20162399) ; 宮脇 富士夫 国立循環器病センター研究所, 実験治療開発部, 室長 (50174222)
• Keywords: 3次元視顕微鏡 / ミニブタ / 受精卵保持システム / マイクロインジェクション / 遺伝子組み換え / 異種移植

Research Abstract

ミニブタが異種臓器移植用ドナー動物として世界に認知され、遺伝子組み換えが欧米で試みられている、我が国では数が現状ではきわめて少ない貴重なミニブタの受精卵にヒト遺伝子を導入するマイクロインジェクション法について効率的なデバイスを開発することが本研究の目的である。
そのために低侵襲的に卵胞卵を採取できる三次元視硬性内視鏡を開発した。さらに薄層(50μm)緻密ガラスで表面コーティングしたマイクロポーラスガラス板にマイクロポケット(直径150μm)をマトリックス(5×5)状に穿ち、それをハウジングに固定して卵浮遊液を循環するミニブタ卵培養装置を開発した。
それを三次元視正立顕微鏡に取り付けてCRTでマイクロポケット内に吸引固定された卵胞卵を立体視し、培養液の性状(pH、O2、CO2など)を制御して卵胞卵を体外培養し、体外受精させる。三次元マイクロステージをコンピュータで制御し、受精卵保持システム内の受精卵にヒト遺伝子を導入するシステムを開発した。

Research Products

• [Publications] 辻 隆之: "ミニブタの役割とその将来" アニテックス. 11(1). 33-38 (1999)
• [Publications] 辻 隆之、ほか: "3次元視ミニブタ受精卵遺伝子組み換え装置の開発" 今日の移植. 11(2). 179-184 (1998)
• [Publications] Fujisato T,Tsuji T,et.al: "The development of an ova holding devicce made of microporous glass plate for genetic engineering" Proceedings-20th Ann Intl Conf-IEEE/EMBS. 2981-2982 (1998)
• [Publications] Tsuji T,et.al: "Microinjection monitoring of minipig fertilized eggs with 3-D microscopes" Proceedings of Intl Conf on New Frontiers in Biomechanical Engineering. 381-382 (1997)
• [Publications] Tsuji T,et.al: "Monitoring of manipulation of minipig fertilized eggs with three-dimensional microscopes" Proceedngs of ICBME'97,ISBMRE'97,and JCCCAS'97. 42-45 (1997)
• [Publications] 辻 隆之、ほか: "ミニブタ受精卵操作用3次元視顕微鏡システムの開発" BME. 11(10). 11-15 (1997)