1997 Fiscal Year Annual Research Report

高等動物染色体の遺伝子発現期における核内配置と構造の高精度解析技術開発

Research Project

Project/Area Number	08554033
Research Institution	NATIONAL INSTITUTE OF GENETICS
Principal Investigator	池村淑道国立遺伝学研究所, 集団遺伝研究系, 教授 (50025475)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	神谷清浜松ホトニクス, システム事業部, 部長奥村克純三重大学, 生物資源学部, 助教授 (30177183)
Keywords	染色体DNA / 核内配置 / non-B型構造 / 多色FISH / テロメア / セントロメア / 遺伝子治療 / アンチセンス
Research Abstract	DNA複製を行い、また遺伝子発現を活発に行っている分裂間期の染色体のDNAは、分裂中期よりも遥かに伸長しているが、染色体DNAの組織化された間期核内配置自体が遺伝子発現やDNA複製の制御に深く係わっている可能性が明らかになりつつある。本研究では、浜松ホトニクスとの共同研究を行い、ヒトの多数の染色体部位の間期核内での3次元配置を解析する多色FISHシステムの開発を行った。特に本年度は、ヒトMHC領域内に見い出した三重鎖を含む非B型構造形成能を持つDNA配列類を対象に(Tenzen et al.,Mol.Cell.Biol.,1997;Sugaya et al.,Gene,1997)、リポフェクション法によりヒト培養細胞に導入したこれら特殊配列プローブにして、その核内配置を鋭敏に検出する多色FISHシステムの開発を進めた。三重鎖を含む非B型構造形成能を持つDNAをプローブとすることで、未変成の間期核内でテロメアとセントロメアを含む特定ゲノム領域が識別可能なことが判明し、リポフェクション法により、生細胞においても識別できることが判明した(Ohno et al.,論文投稿中)。遺伝子導入を行ったゲノム断片の間期核内での三次元配置を知る上で、非B型構造形成部位に着目した方法は、遺伝子治療で注目されているアンチセンスやアンチジーンの技術開発で重要な貢献をすると考えられる。3次元像はセクショニング顕微鏡で撮影したが、励起光側と蛍光側に最適化したフィルターを組み合わせて、コンピュータで制御することで、多色に関しての高精度な識別が実現できた。

Research Products

(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] 天前豊明: "Precise switching of DNA replication timing in the GC content transition area in the human major histocompatibility complex." Mol.Cell.Biol.17. 4043-4050 (1997)
[Publications] 菅谷公彦: "Gene organization of human NOTCH4 and (CTG)n polymorphism in this human counterpart gene of mouse proto-oncogene Int3." Gene. 189. 235-244 (1997)
[Publications] 安藤麻子: "Triplet repeat polymorphism within the NOTCH4 gene located near the junction of the HLA class II and class III regions in narcolepsy." Tissue Antigens. 50. 646-649 (1997)
[Publications] 椎名隆: "Nucleotide sequencing analysis of the 146 kd segment around the IKBL and MICA genes at the centromeric end of the HLA class 1 region." Genomics. in press. (1998)
[Publications] 安藤麻子: "Triplet repeat polymorphism in the NOTCH4 gene within the human major histocompatibility complex in a healthy population and patients wigh a salivary gland tumor in Japan." Tissue Antigens. 50. 66-70 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

高等動物染色体の遺伝子発現期における核内配置と構造の高精度解析技術開発

Principal Investigator

池村 淑道 国立遺伝学研究所, 集団遺伝研究系, 教授 (50025475)

Research Products

[Publications] 天前豊明: "Precise switching of DNA replication timing in the GC content transition area in the human major histocompatibility complex." Mol.Cell.Biol.17. 4043-4050 (1997)

[Publications] 菅谷公彦: "Gene organization of human NOTCH4 and (CTG)n polymorphism in this human counterpart gene of mouse proto-oncogene Int3." Gene. 189. 235-244 (1997)

[Publications] 安藤麻子: "Triplet repeat polymorphism within the NOTCH4 gene located near the junction of the HLA class II and class III regions in narcolepsy." Tissue Antigens. 50. 646-649 (1997)

[Publications] 椎名 隆: "Nucleotide sequencing analysis of the 146 kd segment around the IKBL and MICA genes at the centromeric end of the HLA class 1 region." Genomics. in press. (1998)

[Publications] 安藤麻子: "Triplet repeat polymorphism in the NOTCH4 gene within the human major histocompatibility complex in a healthy population and patients wigh a salivary gland tumor in Japan." Tissue Antigens. 50. 66-70 (1997)

池村淑道国立遺伝学研究所, 集団遺伝研究系, 教授 (50025475)

[Publications] 椎名隆: "Nucleotide sequencing analysis of the 146 kd segment around the IKBL and MICA genes at the centromeric end of the HLA class 1 region." Genomics. in press. (1998)