1997 Fiscal Year Annual Research Report
D,Lを区別する次世代型超微量アミノ酸アナライザーの開発
| Project/Area Number |
08556016
|
|---|
| Research Institution | Tohoku University |
|---|
Principal Investigator |
大類 洋 東北大学, 農学部, 教授 (20100050)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
赤坂 和昭 東北大学, 農学部, 助手 (10201881)
|
|---|
| Keywords | (S)-MNB-カルボン酸 / (S)-TBMB-カルボン酸 / アミノ酸のD,L分析 / 超微量アミノ酸分析 / オンライン-HPLC-励起子CD分析 |
|---|
| Research Abstract |
本年度はペプチドのC-末端からのシークエンス分析への発展が期待できる分析法(アミノ酸をメチルエステルへ導き、さらに水素化ホウ素ナトリウムでアミノアルコールへ変換し、それを(S)-MNB-カルボン酸または(S)-TBMBカルボン酸で標識、HPLCで分離し、その種類とD,Lを蛍光分析する)について研究を行なった。
アミノアルコールのモノ-N-標識化ではアミノアルコールの分離は(S)-MNB-カルボン酸が遥かに優れていることが分かった。しかし、アミノアルコールのD,Lを決定するためには、(S)-MNB-カルボン酸ではHPLCで標準試料との比較が必要であった。一方、(S)-TBMBカルボン酸は、ジ-N,O-標識でアミノアルコールの種類とそのD,L-を良好に分離でき、さらにCDの検出波長を選択することによってそのD,L-を決定できることが分かった。しかし、アミノアルコールごとにあらかじめCDを測定しておき、その検出波長を決定しなければならないという欠点も明らかとなった。そこで、アミノアルコールをあらかじめ無水フタール酸で処理しフタールイミドに導き、水酸基を(S)-TBMB-カルボン酸でエステル化した誘導体はアミノアルコールの種類(アミノ酸の種類に相当する)をHPLCで良好に分離することができ、D,L-をも分離できること、さらに225nmでCD検出すること、その符号によって一義的にアミノアルコールのD,L-をも決定できることを明らかとした。このようにしてアミノ酸の種類、そのD,LをHPLCのオンラインで決定する方法を開発することができた。
|
Research Products
(5 results)
-
[Publications] H.Meguro, H.Ohrui: ""Strategy and design of novel reagents for the fluorometric analysis of biomolecules"" Biosci.Biotech.Biochem. 60・12. 1919-1924 (1996)
-
[Publications] E.Itoh, Y.Nishida, Y.Togashi, Hiroshi Ohrui, Hiroshi Meguro: ""Simultaneous analysis of enantiomeric amino acids based on derivatization with(S)-(+)-2-t-butyl-2-methyl-1,3-benzodioxole-4-carboxylic acid and high-performance liquid chromatography"" Analytical Sciences. 12・8. 551-556 (1996)
-
[Publications] H.Ohrui, E.Itoh, Y.Nishida, H.Horie, H Meguro: ""Potential D,L-amino acid sequence analysis of peptides from the C-teminus"" Biosci.Biotech.Biochem.61・2. 392-395 (1997)
-
[Publications] Y.Nishida, J.-H.Kim, H.Ohrui, H.Meguro: ""On-line HPLC-exciton CD analysis using a chiral benzoyl agent,(S)-TBMB carboxylic acid:A promising approach toward selective identification of enantiomeric diols and diamines"" J.Am.Chem.Soc.119. 1484-1485 (1997)
-
[Publications] K.Shimizu, J.-H.Kim, K.Akasaka, H.Ohrui: ""Application of (S)-TBMB carboxylic acid-based on-line HPLC-exciton CD analysis to acyclic vicinal alcohols and amino alcohols"" Chirality. (in press).
