1997 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト肝組織及び組換え蛋白を用いてインビボ薬物代謝能・排泄能を予測する方法論の開発

Research Project

Project/Area Number	08557125
Research Institution	Graduate School of Pharmaceutical Sciences, The University of Tokyo
Principal Investigator	杉山雄一東京大学, 大学院・薬学系研究科, 教授 (80090471)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	千葉寛千葉大学, 薬学部, 教授 (40159033) 滝川一帝京大学, 医学部, 助教授 (70197226) 加藤将夫東京大学, 大学院・薬学系研究科, 助手 (30251440) 鈴木洋史東京大学, 大学院・薬学系研究科, 助教授 (80206523) 寺崎哲也東北大学, 薬学部, 教授 (60155463)
Keywords	薬物代謝 / 肝ミクロソーム / P450発現系 / 輸送担体 / 肝取り込み / 胆汁排泄
Research Abstract	1.ヒト肝ミクロソームあるいはP450発現系を用いたin vivo薬物肝代謝能の定量的予測 CYP3A4で代謝されるYM796について、ヒト肝ミクロソームを用いたin vitro代謝試験によりKmおよびVmaxを算出し、代謝の非線形性を考慮したdispersion modelに基づいて肝初回通過のアベイラビリティを算出した。別に算出した吸収率や腎クリアランスの値を用いて経口投与後のAUCを予測した結果、実測値とほぼ対応する結果が得られた。また、ヒトCYP3A4のリンパ芽球様細胞への発現系を用いてYM796の代謝試験を行い、得られたパラメータKm,Vmaxおよび各ミクロソームの持つCYP3A4含量を基に予測した代謝クリアランスは、ヒト肝ミクロソームを用いた代謝試験での実測値と比較的良く対応することが示された。P450発現系から肝ミクロソーム、あるいはin vitro試験からin vivo肝代謝能の予測性がP450isozymeにより異なる可能性について、現在検討中である。 2.輸送担体の発現系を用いた薬物の肝取り込みおよび胆汁排泄機構の評価ラット肝臓の血管側膜上の胆汁酸・有機アニオン輸送担体であるNa^+-taurocholate cotransporting polypeptide(Ntcp)あるいはorganic anion transporting polypeptide(oatp)を発現させたCOS細胞および初代培養肝細胞への各種リガンドの取り込みを比較し、肝細胞への取り込みにおける各輸送担体の寄与を見積もった。また、胆管側膜上の有機アニオン輸送担体であるcanalicular multispecific Organic anion transporter(cMOAT)をNIH/3T3細胞に発現させた系において、cMOATの基質として知られるDNP-SGのATP依存性の取り込みが有意に上昇することを確認した。今後、このような発現系を用いて輸送実験を行い、得られた結果を輸送担体の発現量で補正することにより、ヒトにおける薬物の肝取り込みあるいは胆汁排泄能の定量的予測が可能になると考えられる。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] T.Iwatsubo: "Prediction of in vivo drug metabolism in the human liver from in vitro metablism data" Pharmacol.Ther.73(2). 147-171 (1997)
[Publications] T.Iwatsubo: "Prediction of in vivo hepatic metabolic clearance of YM796 from in vitro data by use of human liver microsomes and recombinant P-450 isozymes." J.Pharmacol.Exp.Ther.282(2). 909-919 (1997)
[Publications] T.Iwatsubo: "^1Prediction of species differences (rats,dogs,humans) in the in vivo metabolic clearance of YM796 by the liver from in vitro data." J.Pharmacol.Exp.Ther.283(2). 462-469 (1997)
[Publications] H.Sasabe: "Carrier-mediated hepatic uptake of quinclone antibiotics in the rat." J.Pharmacol.Exp.Ther.282(1). 162-171 (1997)
[Publications] M.Yamazaki: "Biliary excretion of pravastatin in rats:contribution of the excretion pathway mediated by canalicutar mults:specific organic anion trans porter c(MOAF)." Drug Metab Dispos.25(10). 1123-1129 (1997)
[Publications] K.Ito: "Functional analysis of a canalicular multispecific organic anion transporter cloned from rat liver" J.Biol.Chem.273(3). 1684-1688 (1998)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト肝組織及び組換え蛋白を用いてインビボ薬物代謝能・排泄能を予測する方法論の開発

Principal Investigator

杉山 雄一 東京大学, 大学院・薬学系研究科, 教授 (80090471)

Research Products

[Publications] T.Iwatsubo: "Prediction of in vivo drug metabolism in the human liver from in vitro metablism data" Pharmacol.Ther.73(2). 147-171 (1997)

[Publications] T.Iwatsubo: "Prediction of in vivo hepatic metabolic clearance of YM796 from in vitro data by use of human liver microsomes and recombinant P-450 isozymes." J.Pharmacol.Exp.Ther.282(2). 909-919 (1997)

[Publications] T.Iwatsubo: "^1Prediction of species differences (rats,dogs,humans) in the in vivo metabolic clearance of YM796 by the liver from in vitro data." J.Pharmacol.Exp.Ther.283(2). 462-469 (1997)

[Publications] H.Sasabe: "Carrier-mediated hepatic uptake of quinclone antibiotics in the rat." J.Pharmacol.Exp.Ther.282(1). 162-171 (1997)

[Publications] M.Yamazaki: "Biliary excretion of pravastatin in rats:contribution of the excretion pathway mediated by canalicutar mults:specific organic anion trans porter c(MOAF)." Drug Metab Dispos.25(10). 1123-1129 (1997)

[Publications] K.Ito: "Functional analysis of a canalicular multispecific organic anion transporter cloned from rat liver" J.Biol.Chem.273(3). 1684-1688 (1998)

杉山雄一東京大学, 大学院・薬学系研究科, 教授 (80090471)