1996 Fiscal Year Annual Research Report
チロシンカイネース阻害作用に基づく新しいタイプの抗リュウマチ薬の開発研究
| Project/Area Number |
08557136
|
|---|
| Section | 試験 |
|---|
| Research Institution | The University of Tokushima |
|---|
Principal Investigator |
守時 英喜 徳島大学, 薬学部, 教授 (10035545)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小野 幸久 大塚製薬(株), 細胞工学研究所, 研究員
滝口 祥令 徳島大学, 薬学部, 助教授 (40163349)
高石 喜久 徳島大学, 薬学部, 教授 (60035558)
久山 哲廣 徳島大学, 薬学部, 助教授 (70130383)
|
|---|
| Keywords | 血管平滑筋 / リュウマチ / トリプトキノン / 一酸化窒素 / 酵素誘導 / メッセンジャーRNA / 血管内皮 / チロシンキナーゼ |
|---|
| Research Abstract |
ニシキギ科クロズルは古くから抗リュウマチ作用を有することが知られており,その薬効成分であるトリプトキノン類は民間療法にクロズルが用いられてきた実績による安全性と,抗炎症作用を始めとする幅広い薬理効果が期待できる。そこでトリプトキノン類のエンドトキシン(LPS)及びinterleulin-1(lL-1)による平滑筋内誘導型NO合成酵素(INOS)の発現を中心に,併せて内皮における構成型NO合成酵素(cNOS)の活性化に関与する内皮内Ca^<++>動態に対する効果について検討した。摘出血管標本あるいは培養血管平滑筋細胞において,トリプトキノン誘導体の一つであるトリプトキノンA(TQA)はLPSもしくはlL-1によるアルギニンを介した血管弛緩反応,cGMP産生,NO_2-蓄積およびiNOSmRNAの発現を抑制し,その抑制機序がiNOS遺伝子発現に至るまでの過程を阻害することによることを明らかにした。また我々はTQAに類似する構造を持つチロシンキナーゼ阻害薬herbimycinAが,TQAと同様な機序でiNOS遺伝子発現抑制作用を持つことを示し,さらに各種TQA誘導体を合成し,その構造活性相関について検討したところ両薬物に共通するキノイド構造がiNOS誘導阻害に必須であることも明らかにした。また内皮細胞のcNOSに対する作用も検討し,cNOSによるNO産生をTQA,チロシンキナーゼ阻害薬はやはり共に抑制し,抑制部位も細胞内へのCa^<++>流入以前であるという点で一致した。そこでチロシンキナーゼの関与を確実にするため,ウェスタンブロットによりチロシン・リン酸化タンパク質の検出を試みており,現在は組織標本からのSDS-PAGEによる種々のタンパク質の分離まで終わり,抗ホスホチロシン抗体によるチロシン・リン酸化タンパク質の特異的検出のための条件特定を検討中である。
|
Research Products
(6 results)
-
[Publications] Moritoki,H.: "Inhibition by triptoquinone-A of LPS-and IL-1b-primed induction of NO synthase in rat thoracic aorta." Life Sci.59. PL49-54 (1996)
-
[Publications] Niwa,M.: "Suppression of inducible nitric oxide synthase mRNA expression by triptoquinone A." Biochiem.Biophys.Res.Commun.224. 579-585 (1996)
-
[Publications] Moritoki,H.: "Inhibition by SK & F96365 of NO-mediated relaxation induced by Ca^<2+>-ATPase inhibitors in rat thoracic aorta." Br.J.Pharmacol.117. 1544-1548 (1996)
-
[Publications] Mori,K.: "Endothelium-dependent relaxation of rat thoracic aorta by amrinone-induced nitric oxide release." Eur.Heart J.17. 308-316 (1996)
-
[Publications] Moritoki,H.: "Possible involvement of tyrosine kinase in the LPS-promoted initiation of L-arginine-induced relaxation of rat aorta mediated by induction of NO synthase." Life Sci.57. PL125-130 (1995)
-
[Publications] Hisayama,T.: "Tyrosine kinase may participate in Ca^<2+> entry for endothelial nitric oxide production." Jap.J.Pharmacol.67. 181-183 (1995)
