1997 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
08558087
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Research Institution | Kumamoto University |
Principal Investigator |
鈴木 操 熊本大学, 医学部, 助教授 (60253720)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
辻 正義 九動(株), 企画室, 室長
津久見 清 熊本大学, 医学部, 助手 (60188521)
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Keywords | Cre / loxp / トランスジェニックマウス / ノックアウトマウス / 相同組換え / 胚凍結保存 / 巨大ゲノムDNA / ES細胞 |
Research Abstract |
変異マウス作成の生命科学研究全般における有用性に鑑み、本研究では、近い将来共同利用施設に受け継がれることを期待して、変異マウス作成のための応用技術、周辺技術の開発(1)と、変異マウス作成の実用化(2)を図った。 (1)技術開発a)トランスジェニックマウスの作製において、導入遺伝子の発現効率を高める目的で、インスレーター配列を導入したトランスジェニックマウスの作製を引き続き行った。b)遺伝子の細胞質内への注入によるトランスジェニックマウス作製法の技術開発を進めた。c)組織特異的なノックアウトマウスを作成するため、種々の特異的に発現する遺伝子のプロモーターの下でCreを発現する、様々なトランスジェニックマウスの作成を進めた。d)様々な人工酵母染色体および人工細菌染色体を用いて、数百kb以上の巨大ゲノムDNAの受精卵への注入し、トランスジェニックマウスの作製効率、組み込まれた巨大DNAのインテグリティ等を検討した。e)様々な目的に対応した相同組換えベクター作成法を開発し、また、相同組換え体の同定法、変異マウス作成技術の簡便化を進めた。f)neo耐性変異マウスより、neo耐性フィーダー用細胞の大量ストックと配布体制の確立を行った。g)マウス胚の凍結法、保存法、輸送法の改良を更に進めた。 (2)技術指導a)受精卵へのDNA注入によるトランスジェニックマウスの作成b)ターゲティングベクターの作製法c)ES細胞の培養、相同組換え技術d)胚盤胞内および8細胞胚への注入によるキメラマウス作成e)マウス胚の凍結保存および融解法の技術指導を行った。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Yamada, K. et al.: "Activation of the human transglutaminase 1 promoter in transgenic mice : terminal differentiation specific expression of the TGM-lacZ transgene in keratinized stratified squamous epithelia." Human Molecular Genetics. 6・13. 2223-2231 (1997)
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[Publications] Hayahsi, R. et al.: "The PU. 1 binding site is a cis-element that regulates pro-B/Pre-B specificity of V_K-I_K joining." J. Immunology. 159. 4145-4149 (1997)
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[Publications] Ueda, Y. et al.: "The mGl uR6 5' upatream transgene sequence directs a cell-specific and developmentally regulated expression in retinal rod and on-type cone bipolar cells." J. Neurosci.17・9. 3014-3023 (1997)
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[Publications] Kimura, S. et al.: "2.1 kb 5'-flanking regin of the brain type dystrophin gene directs the expression of lacZ in the cerebral cortex, but not in the hippocampus." J. Neuro. Sci.147. 13-20 (1997)
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[Publications] Hatada, I. et al.: "Aberrant methylation of an imprinted gene U2afl-rsl(SP2)caused by its own transgene." J. Biolo. Chemi.272・14. 9120-9122 (1997)
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[Publications] Fukumoto, S. et al.: "Genetic remodeling of gangliosides resulted in the enhanced reactions to the foreign substances in skin." Glycobiology. 7・8. 1111-1120 (1997)
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[Publications] Matsuda, J-I. et al.: "Transgenic mouse expressing a full-length hepatitis C virus cDNA." Jpn. J. Cancer Res.89. 150-158 (1998)