セメントイン(新発見内在性架橋接着分子)を利用したタンパク質の糊付け技術の開発

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08558096
• Research Institution: TOKYO INSTITUTE OF TECHNOLOGY
• Principal Investigator: 鈴木 陽子 東京工業大学, 生命理工学部, 教務職員 (30179270)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 橘 眞郎 エーザイ株式会社, 研究開発本部(シンガポール大学・客員教授), 部長
• Keywords: タンパク質の糊付け / セメントイン / トラッピン / GFP / トランスグルタミナーゼ / プロテアーゼインヒビター / アルツハイマー病 / 遺伝子

Research Abstract

私たちが見つけた糊代をもったタンパク質(トラッピン)に関する基礎と応用研究を行い以下の成果を得た。(1)トラッピン遺伝子は,エクソンよりもイントロンの方がよく保存されているという際だった特徴を有する。これは通常の遺伝子とは全く逆であり,どのようにしてそのようなことが起こったかは興味深い問題である。イポイノシシのトラッピン遺伝子を詳細に解析し,この問題を解決した。すなわち,ジーンコンバージョン(gene conversion)によってイントロンの配列がもとのものと置き換えられている結果,イントロンにたまった変異が消去され,見かけ上,不変のように見えていることが明らかになった。(2)糊代部分を利用して,タンパク質架橋酵素トランスグルタミナーゼの簡便かつ高感度検出法を開発した。すなわち,糊代部分に蛍光性のGFP(greenfluorescent protein)をつなげた融合タンパク質を作製したところ,トランスグルタミナーゼの優れた蛍光性基質となり,組織抽出液中及び組織切片上のトランスグルタミナーゼを容易に検出できることが明らかになった。(3)アルツハイマー病等の中枢神経疾患におけるトラッピンとトランスグルタミナーゼの関与を調べるために,変性脳におけるこれら分子の局在を免疫組織化学的に調べ,老人班の形成に関与するらしいことをつきとめた。

Research Products

• [Publications] Furutani,Y.et al.: "Evolution of the trappin multigene family in the Suidae." J.Biochem.124. 491-502 (1998)
• [Publications] Yamada,T.et al.: "Possible roles of transglutaminases in Alzheimer's disease." Dement.Geriatr.Cogn.Disord.9. 103-110 (1998)
• [Publications] Okuda-Ashitaka,E.et al.: "Nocistatin,a peptide that blocks nociceptin action in pain transmission." Nature. 392. 286-289 (1998)