1997 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
08660094
|
|---|
| Research Institution | The University of Tokyo |
|---|
Principal Investigator |
石井 正治 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (30193262)
|
|---|
| Keywords | pyruvate synthase / フェレドキシン / 還元的TCAサイクル |
|---|
| Research Abstract |
好熱性水素細菌Hydrogenobacter thermophilusTK-6株において機能していると推定されていた還元的TCAサイクルに関して、以下の点を明らかにすることにより、その機能性を証明した。
1.フェレドキシンの精製及び特徴付け
無細胞抽出液をQーSepharose,DEAEー5PW,Superdex75のカラムクロマトに順次供することにより、電気泳動的に単一な標品を得た。さらに、蛋白化学的特徴付けを行った。
2.ピルビン酸シンターゼの精製及び特徴付け
無細胞抽出液をDEAE-Sepharose CLー6B、PAーQA,Hydroxyapatite,Superdex-200のカラムクロマトに順次供することにより、電気泳動的に単一な標品を得た。さらに、蛋白化学的特徴付けを行った。
3.αーKGシンターゼ、ピルビン酸シンターゼとフェレドキシンとの反応性
それぞれの酵素の逆反応(CO_2発生方向)において、それぞれの精製酵素は精製フェレドキシンとの反応性を示した。一方、CO_2固定方向においては、直接の反応性を検出することはできなかった。この原因が主としてCoAー化合物の不安定さによるものと考えられた。そこで、少量の無細胞抽出液を共存させそれぞれのCoAー化合物を酵素反応により供給したところ、炭酸固定反応が検出され、反応産物も同定された。
|
-
[Publications] Ki-Seok Yoon ら: "Carboxylation Reactions of Pyruvate:Ferredoxin Oxidoreductase and 2-Oxogluterate Ferredoxin Oridoreductase from Hydrogenobacter thermophilus TK-6" Biosci.Biotech.Biochem.61・3. 510-513 (1997)
-
[Publications] Ki-Seok Yoon: "Purification and characterization of pyruvate:ferredoxin oxidoreductase from Hydrogenobacter thermophilus TK-6" Arch.Microbiol.167・2. 275-279 (1997)
-
[Publications] Masaharu Ishii ら: "Purification and characterization of Ferredoxin from Hydrogenobacter thermophilus Strain TK-6" Biosci.Biotech.Biochem.60・9. 1513-1515 (1996)
