プロテインホスファターゼ2Cβ遺伝子の発現制御-精巣特異的発現と多重プロモーター

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08670133
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 田村 眞理 東北大学, 加齢医学研究所, 教授 (20124604)
• Keywords: プロテインホスファターゼ / 遺伝子発現 / ゲノムDNA / プロモーター / 精巣

Research Abstract

我々はこれまでに、PP2Cには6種類のアイソフォーム(α、β-1, β-2, β-3, β-4およびβ-5)が存在することを明らかにしてきた。これらのうちαとβは異なった遺伝子産物であり、βの5種類のアイソフォームは単一のpre-mRNAからの選択的スプライシングの産物である。また、これまでの研究の結果、マウス精巣の第1減衰分裂パテキン期の精母細胞において、PP2Cβ-3, -4および-5の発現が著しく上昇することが明らかとなった。そこで、今回、精母細胞におけるPP2Cβ遺伝子の発現制御機構の解明を目的に、PP2CβゲノムDNAのクローニングと構造解析およびRT-PCRを用いた転写産物の解析を行った。その結果、翻訳開始点を含むエクソン(IV)の上流に3つのエクソン(I, II, III)が存在し、新生児マウス精巣(精祖細胞のみを含む)ではIIVを含む転写産物のみが検出されたのに対し、成獣マウス精巣の転写産物では、II III IVエクソンの読みとりが行われていた。さらに、Iエクソンの上流には構成的発現に関与すると考えられるプロモーター活性が検出された。以上の結果から、IIエクソンの上流に精巣特異的発現に関わるプロモーターが存在することが示唆され、現在その解析を進めている。また、FISH法により、PP2Cβ遺伝子がマウス17番染色体のE領域にマップされることが明らかになった。

Research Products

• [Publications] Shunsuke Kato: "Differntiation-dependent enhanced expression of protein phosphatase 2Cβ in germ cells of mouse seminiferous tubules." FEBS Lett.396. 293-297 (1996)
• [Publications] Yoji Sasahara: "Okadaic acid suppresses neural differentiation-dependent expression of the neurofilament-L gene in P19 embrynal carcinoma cells by posttranscriptional modification." J. Biol. Chem.271. 25950-25957 (1996)
• [Publications] Takayasu Kobayashi: "Enhanced UV sensitivity of yeast cells induced by over expression of Mg^<2+>-dependent protein phosphatase α (Type 2Cα)。" Mutation Res.362. 213-217 (1996)
• [Publications] Motoko Ohnishi: "Localization of the Mouse protein serine/threonine phosphatase 2Cβ gene to chromosome 17E4-5." Genomics. 32. 134-136 (1996)
• [Publications] Noriko Yokoyama: "Purification and characterization of protein phosphatase 2C in rat parotid acinar cells : two forms of Mg^<2+>-activated histone phosphatase and phosphorylation by cAMP-dependent protein kimase." Arch. Biochem. Biophys.331. 1-8 (1996)
• [Publications] Masakatsu Nishikawa: "Up-regulation of protein serine/threonine phosphatase type 2C during 1α, 25-dihydroxyvitamin D_3-induced monocytic differentiation of leukemic HL-60 cells." FEBS Lett.375. 299-303 (1996)
• [Publications] Takayasu Kobayashi: "Methods in Molecular Biology" Humana Press (in press), (1997)