1996 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
08670163
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Research Institution | Akita University |
Principal Investigator |
杉山 俊博 秋田大学, 医学部, 教授 (00127242)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
三浦 直行 秋田大学, 医学部, 助教授 (40165965)
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Keywords | 多分化能 / oval cell / 肝臓始原細胞 / 肝細胞 / 肝細胞転写因子 / LECラット |
Research Abstract |
【研究結果】 1.肝臓始原細胞の細胞源としてより頻度の多いLECラットを用いて、目的の細胞を容易にしかも大量に得た。分離したoval cellは、現在まで1年間以上長期細胞培養が可能であり、また凍結保存できた。細胞染色法から、γ-GTP,GST-P,AFP,cytokeratin・18と19は陽性であったが、albuminは陰性であった。肝細胞転写因子のうち、HNF-3βmRNAのみが発現していた。2.このoval cellを無アルブミンラットに移植したところ、移植した細胞は肝細胞に形態学的にも変化し、また免疫組織学的にもアルブミンの産生が認められた。以上の結果、oval cellは、胆管上皮細胞と肝細胞の両方の性質を発現する多分化能を有している細胞であることが判明した。 【考察】 本研究において、われわれはLECラットからoval cellを分離し、その性質を明らかにした。形態学的にoval cellは肝細胞と胆管上皮細胞の両性質を持っていることから、化学発癌剤処理したラットの肝臓に出現するoval cellと同様な細胞であると思われた。しかし、従来報告されたoval cellと相違する点は、培養初期からalbumin合成能がないことや肝細胞転写因子のうちHNF-3βしか発現していないことである。我々が分離したoval cellは1年以上継代培養可能であり、さらに組み替えレトロウィルスの感染やプラスミッドDNAを容易に導入することができる。長期に培養した細胞でも肝臓に移植すれば移植されたoval cellは肝細胞に形質転換できる。これらのことから、我々のoval cellは遺伝子導入のよい運搬細胞であると思われる。
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[Publications] Yasui,O.: "Isolation of oval cells from Long-Evance Cinnamon rats and their transformation into hepatocytes in vivo in the rat liver." Hepatology. 25. 329-334 (1997)
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[Publications] Masuda,Y.: "Platclet-derived growth factor B-chain homodimer suppressing a convulsion of epilepsy model mouse El." Biochem.Biophys.Res.Commun.,. 223. 60-63 (1996)
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[Publications] Umemura,S.: "Enhancement of TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL) method using mung bean nuclease,a single-stranded DNA digestion enzyme." J.Histochem.Cytochem.44. 125-132 (1996)
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[Publications] Hirasawa,F.: "The effect of silver administration on the biosynthesis and the molecular properties of rat ceruloplasmin." Biochem.Biophys.Acta. (in press). (1997)
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[Publications] Yamazaki,Y.: "The use of capillary liquid chromatography / electrospray mass spectrometry to identify a specific cysteine residue susceptible to S-thiolation in recombinant human Cu,Zn superoxide dismutase." Res.Commun.Biochem.Cell Biol.(in press). (1997)
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[Publications] Kuhara,M.: "Enhancing effect of a congenital disorder in methionine metabolism on the development of spontaneous hepatitis and hepatoma in LEC rats." J.Trace Elem.Exp.Med.(in press). (1997)