1996 Fiscal Year Annual Research Report
活性酸素による血管内皮・平滑筋細胞のアポトーシスのメカニズムの解明 -動脈硬化発症機作との関連について-
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08670174
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
鈴木 敬一郎 大阪大学, 医学部, 助手 (70221322)
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| Keywords | アポトーシス / 活性酸素 / 血管内皮細胞 / グルタチオン / 抗酸化物質 / NO (peroxynitrite) |
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| Research Abstract |
血管内皮細胞(ヒト臍帯静脈由来)、血管平滑筋細胞(ラット大動脈由来)をCO_2インキュベータ-で培養し、活性酸素種を負荷(O_2:Xanthine-Xanthine oxidese、H_2O_2、NOなど)したところアポトーシスの誘導が観察された。アポトーシスの誘導はNO(peroxynitrite)、H_2O_2、O_2の順に強かった。アポトーシスの発生についてはDNAの断片化のみならず、アポトーシス小体の観察など電子顕微鏡を用いた形態学的な確認も行った。また従来より血管内皮細胞に対してアポトーシスを特異的に誘導することで知られているヘビ毒を加えたところ、アポートシスとともに細胞内の過酸化物の増加が2',7'-dichlorofluorescin diacetate(DCFH-DA)を用いたフローサイトメトリーで確認された。これらの細胞に細胞内グルタチオン濃度を低下させるButhionine sulfoximine(BSO)を添加すると細胞死は加速し、グルタチオンエステルの添加により部分的に改善した。またCu,Zn-SOD阻害剤であるDiethyldithio-carbamate(DDC)の影響はグルタチオン阻害に比し軽微であった。またMn-SODを誘導するホルボールエステル、TNFを添加したところBSOによるアポトーシスが抑制された。以上より血管内皮細胞のアポトーシスには活性酸素が関与しており、グルタチオン、Mn-SODなどの抗酸化物質が保護的に作用しているのが明らかになった。
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[Publications] Y.Kayanoki: "The protective role of glutathione peroxidase in apoptosis induced by ractive oxygen species." J.Biochem.119. 817-822 (1996)
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[Publications] A.Hoshi: "Glycation and inactivation of sorbitol dehydrogenase in normal and diabetio rats" Biochem.J.318. 119-123 (1996)
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[Publications] H.Kaneto: "Reducing sugar triggers oxidative modification and apoptosis in pancreatic β-cells by provoing oxidateve stress through glycation reacton" Biochem.J.320. 855-863 (1996)
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[Publications] K.N.Islam: "TGF-β1 triggers oxidative modifications and enhances apoptosis in HIT-cells through accumulation of reactive oxygen species by suppression of catalase and glutathione peroxidase" Free Rad.Biol.Med. 22. 1007-1017 (1996)
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[Publications] E.Miyoshi: "High expression of heparin-binding EGF-like growth factor in rat hepatocarcinogenesis" Int.J.Cancer. 68. 215-218 (1996)
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[Publications] Y.Hatanaka: "A role of peroxides in Ca Ionophore-induced apoptosis in cultured rat cortical neurons" Biochem.Biophys.Res.Commun.227. 513-518 (1996)
