1996 Fiscal Year Annual Research Report
癌特異的糖鎖抗原の合成酵素遺伝子プロモーターを用いた遺伝子治療
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08670181
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
古川 圭子 三重大学, 医学部, 助手 (50260732)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
古川 鋼一 三重大学, 医学部, 助教授 (80211530)
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| Keywords | 糖鎖抗原 / 癌関連抗原 / 糖転移酵素遺伝子 / 遺伝子治療 / プロモーター / レトロウイルス / 殺細胞遺伝子 |
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| Research Abstract |
癌関連抗原の多くは糖鎖抗原であり、幾つかの癌関連糖鎖抗原は癌の診断、抗体治療に応用されている。その中で、神経外胚葉由来の腫瘍では、酸性糖脂質GD2やGD3が、HTLV-I^+細胞ではGD2の特徴的な発現が認められる。私達はGM2/GD2合成酵素のゲノム遺伝子を単離し、そのプロモーター/エンハンサー領域を解析した。本研究では、このように明らかにされた癌細胞特異的発現を担うプロモーター/エンハンサーと、細胞毒性遺伝子を利用した癌の特異的遺伝子治療法への応用を目的とし、今年度は以下の結果を得た。
1)本酵素遺伝子の癌細胞特異的発現を担うプロモーター/エンハンサーとHSV-TK(単純ヘルペスチミジンキナーゼ)遺伝子を連結したレトロウイルス発現ベクターを作製した。
2)本酵素遺伝子の高発現細胞株AS(アストロサイトーマ)に上記レトロウイルスベクターを導入し、stable transfectantを樹立した。3)細胞培溶液に種々の濃度のガンシクロビル(GCV)を添加し、細胞増殖抑制効果を検討した結果、親株ではGCV:5x10^4Mでも増殖抑制が認められないが、stable transfectantではGCV:5x10^<-6>Mで70%以上の増殖抑制が認められた。今後、ウイルス溶液を作製し、本酵素遺伝子高発現細胞株および非発現細胞株における殺細胞効果の比較、更にはin vivoにおける抗腫瘍効果について検討を進める。
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[Publications] Takamiya,K.: "Mice with disrupted GM2/GD2 Synthase gene lack complex gangliosides,but exlcibit only subtle defects in their nervous system." Proc.Natl.Acad.Su.USA. 93. 10662-10667 (1996)
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[Publications] Furukawa,K.: "Genomic organization and chromosomal assignment of the human B1,4-N-acetylgalactosaminyltransferrise gene:Identification of multiplt transcription units." J.Biol.Chem.271. 20836-20844 (1996)
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[Publications] Okada,K.: "Independent and differential expiession of two isotypes of human Nin23:Analysis of the promcterregion of the nin23-H1 and H2 genes." Oncogene. 13. 1937-1943 (1996)
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[Publications] Yamamoto,A.: "Heterogeneity in the expression pattern of two ganglioside synthase genes during mouse brain development." J.Neurochem.66. 26-34 (1996)
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[Publications] Okada,M.: "High expression of ganglioside GD3 Synthase gene in adult T cell leukemia cells unrelated to the gene expression of human T lymphetropic virus type I" Cancer Res.56. 2844-2848 (1996)
