1998 Fiscal Year Annual Research Report
NK細胞と主要組織適合遺伝子複合体ClassI分子の関連
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08670519
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
木浦 勝行 岡山大学, 医学部・附属病院, 助手 (10243502)
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| Keywords | NK細胞 / HLA ClassI分子 / NK細胞リセプター / KIR / Negative Signal |
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| Research Abstract |
1) HLAのhomozygous donor(A2402/A2402,B0702/B0702,Cw0702/Cw0702)の末梢血単核球層よりMiniMACS Separation systemによって抗CD3、抗CD4、抗CD8、抗CD19抗体のカクテルを使用し、T細胞、B細胞を除去した。nonT.nonB細胞のfractionをBalb/c miceに3度免疫し、ScreeningにはヒトNK細胞株NK92(A0301/A1101,B0702/B44031,Cw0702/Cw1602)を使用した。FACScanを利用し2000wellよりscreeningを行い、17抗体を作製した。3抗体(4-4-24-5,4-2-44-18,4-2-44-28)を解析したが、いずれも1gGlでNK細胞の一部と下細胞の一部に反応することが判明している。4-4-24-5抗体はEffectorをNK92とし標的細胞にK562細胞をおいたときの細胞傷害活性を約20%抑制した。
2) Killer inhibitory receptorのひとつであるLy-49Aはそのcytoplasmic domainにimmunoreceptor tyrosinebased inhibitory motif(ITIM,YxxV))を有しH-2D^d.H-2D)^kより抑制シグナルをうける。マウスのB細胞株A20にLy-49Aをtransfectし、B細胞受容体(BCR)とLy-49AのクロスリンクによってBCR刺激によるIL-2分泌がLy-49Aの発現レベルに比例して抑制されることを確認した。BCR刺激による細胞内カルシウムの上昇はほとんど影響を受けなかった。ITIMの機能に重要なtyrosineをphenylalaninに置換したmutant cloneY/F(FxxV)ではIL-2の部分的抑制が見られたのに対し、細胞内領域の欠損したcloneΔN37この抑制は全く認められなかった。チロシンリン酸化されたwild typeのLy-49AのみSHIPではなくSHP-1に会合したことから、ITIM内のtyrosineがSHP-1の会合に必要なことが確かめられた。Ly-49Aの抑制経路にはITIM/SHP-1に依存する経路としない経路があると考えられる。
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[Publications] W.Zheng,K.Kiura,I.Nakamura et al: "Murine NK cell allospecificity-lis defined by inhibitory ligands" The Journal of Immunology. 156. 4651-4655 (1996)
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[Publications] H.Yamane,K.Kiura,M Tabata et al: "Small cell Lung cancer can express CD34 antigen" Anticancer Reasearch. 17. 3627-3632 (1997)
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[Publications] T.Moritaka,K.Kiura H.Ueoka et al: "Cisplatin-resistant human small cell Lung cancer cell line shows collateral sensitivity to vinca alkaloids" Anticancer Research. 18. 927-934 (1998)
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[Publications] K.Kiura,S.Watarai H.Ueoka et al: "Analteration of ganglioside composition in cisplatin-resistant Lung cancer cell line" Anticancer Research. 18. 2957-2960 (1998)
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[Publications] H.Ueoka,K.Kiura M.Tabata et al: "Arandomized trial of hybrid administration of cyclophosphamide,doxovubcine vincristine (CAV)/cisplatin and etoposide versus sequential…" Cancer. 83. 283-290 (1998)
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[Publications] H.Ueoka,M.Tabata K.Kiura et al: "Fractionated administration of irinotecan and cisplatin for treatment of lung cancer : G" British Journal of Cancer. 79(5/6). 984-990 (1999)
