気道粘膜イオントランスポートの調節における一酸化窒素の役割

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08670681
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Tokyo Women's Medical University
• Principal Investigator: 玉置 淳 東京女子医科大学, 医学部, 講師 (60147395)
• Keywords: 気道上皮細胞 / イオントランスポート / 一酸化窒素 / サイクリックAMP / Cl分泌 / β刺激薬 / タキキニン / 気道炎症

Research Abstract

1.気道粘膜電気的特性の制御における一酸化窒素(NO)の役割
家兎気管粘膜におけるpotential differenceをin vivoの条件下で測定した。Naチャネル阻害薬の存在下で測定したPD(Cl依存性PD)は、サルブタモ-ル,フォルスコリン,ブラディキニン,サブスタンスP,ニューロキニンAのいずれの添加によっても濃度依存的に増加した。これらの反応は、NO合成酵素阻害薬であるL-NAMEおよびL-NMMAにより抑制され、内因性NOが上皮細胞のCl分泌に関与する可能性が示唆された。
2.気道上皮由来のNOの測定
ポーラログラフィーの手法を用い、培養気道上皮細胞由来のNO遊離を測定した。上記薬剤は、いずれもNO産生を濃度依存的に増加させた。また、以上の反応は細胞内cAMP濃度との相関がみられたが、Ca^<2+>-カルモデュリンアンタゴニストの影響は受けなかった。よって、cAMPによるNO合成酵素の調節機構の存在が明らかとなった。
3.NO合成酵素サブタイプの決定
培養上皮細胞に、cNOS,iNOS各々のモノクローナル抗体を用いた免疫細胞化学およびRT-PCRを用いたNOSmRNAの検討を行い、Cl分泌に関わるMOSはcNOSであることが判明した。

Research Products

• [Publications] J.Tamaoki: "Hypoxia impairs nitrovasodilator-induced pulmonary vasodilation : role of Na-K-ATPase activity." American Journal of Physiology. 271. L172-L177 (1996)
• [Publications] 玉置 淳: "肺における一酸化窒素(NO)の作用" アレルギーの臨床. 16. 224-225 (1996)
• [Publications] J.Tamaoki: "Cholinergic control of rabbit tracheal transepithelial potential difference in vivo." European Respiratory Journal. 9. 1632-1636 (1996)