1997 Fiscal Year Annual Research Report
末梢神経障害におけるconnexin異常と障害メカニズムの検討
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08670713
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
由村 健夫 九州大学, 医学部, 講師 (00201054)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐竹 真理恵 九州大学, 医学部, 医員
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| Keywords | Charcot-Marie-Tooth病 / connexin / gap junction |
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| Research Abstract |
1.変異connexin32(Cx32)の細胞へのtransfection
日本人Charcot-Marie-Tooth病typeXでの変異Cx32の2種(C53S,P172R)をC6細胞に感染させ、機能を検討した。
(1)変異Cx32の発現はmRNAレベルでも、蛋白レベルでも、そのsize,量とも野生型Cx32と同じであった。即ち変異Cx32も蛋白まで正常のプロセッシングを受けていると考えられた。
(2)細胞の免疫染色で観察すると、野生型Cx32感染細胞では細胞膜がdot状に染まったのに対して、変異Cx32では2種とも細胞質が強く染まり、細胞膜はdot状には染まらなかった。即ち変異Cx32蛋白は細胞膜まで移行していない可能性が考えられた。
(3)lucifer yellowの細胞間移動を観察すると、野性型Cx32感染細胞では十分な移動があるのに対して、変異型では殆ど移動は観察されない。即ち変異型Cx32は正常なgap junctionを形成しえないと考えられた。
(4)変異型Cx32感染細胞のミエリン遺伝子発現と細胞増殖能は、野生型のそれと差はなかった。即ち少なくともこの実験系では、変異型Cx32がそれらに影響を及ぼしている証拠は得られなかった。
2.培養シュワン細胞でのCx32の発現
後根神経節細胞とシュワン細胞のco-cultureでCx32の発現を検討した。ミエリン塩基性蛋白(MBP)とPo蛋白は培養の2日から発現しているのに比べ、Cx32は培養開始後1週間以後に始めて出現した。それはmRNAレベルでも蛋白レベルでも同様であった。以前のin vivoのデータと併せて、Cx32はミエリン形成にはさほど必要ではなく、その維持により必要であることが考えられた。
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[Publications] Yoshimura,T.et al.: "Connexin 43 is another gap junction protein in the pevipheral nervous system" J.Neurochem. 67. 1252-1258 (1996)
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[Publications] Satake,M.et al.: "Connexin 32 gene expression in rat sciatic nerves and culturd Schnann" Dev.Neurosci. 19. 189-195 (1997)
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[Publications] Yoshimura,T.et al.: "Mutations of connexin 32 in Charcot-Mariz-Tooth dicease typox interfere with cell-to-cell communications but not cell proliferation and lnyslin-spacific gene expression" J.Neurosci.Res.51. 154-161 (1998)
