1997 Fiscal Year Annual Research Report

副腎白質ジストロフィーの発症機構に関する研究

Research Project

Project/Area Number	08670871
Research Institution	GIFU UNIVERSITY
Principal Investigator	鈴木康之岐阜大学, 医学部, 助教授 (00163014)
Keywords	副腎白質ジストロフィー / 極長鎖脂肪酸活性化酵素
Research Abstract	副腎白質ジストロフィー(ALD)はペルオキシソーム病の中で最も頻度の高い進行性脱髄性疾患で、ALD蛋白が病因蛋白質であるが、極長鎖脂肪酸活性化酵素(VLACS)の障害が病態と関連していると考えられている。我々はVLACSの精製・クローニングと患者解析を通じてALDの病態生理を明らかにする目的で以下の研究を行った。 (1)VLACSの精製:ラット肝ペルオキシソーム画分よりVLACSを精製し、分子量約235kDa,サブユニット分子量約70kDa、極長鎖脂肪酸に活性を有し既知の長鎖脂肪酸活性化酵素と異なることを明らかにした。 (2)ラットVLACS cDNAのクローニング:全長2972bpで620アミノ酸をコードし、推定分子量70692で、精製酵素と一致した。mRNAは約3kbで、主に肝臓と腎臓で発現し、ペルオキシソームとミクロソーム局在と考えられた。COS-1細胞で約50倍の活性上昇を認めた。Fatty acid transport proteinと相同性を有していた。 (3)ヒトVLACS cDNAのクローニングと遺伝子座位:ヒトVLACS cDNAはラットと同じく620アミノ酸をコードしていた。ヒトVLACS遺伝子座位はFISH法により15q21.2と決定された。 (4)ヒトVLACSの抗体作成:ラットVLACSの抗体がヒトVLACSと反応不良のため、ヒトcDNAよりヒトVLACSを大腸菌内で大量発現させ、カラム精製した。現在ウサギに免疫中である。 (5)ヒトVLACSの発現:ヒトVLACS cDNAを線維芽細胞内で発現させるため、発現ベクターに組み込み、現在トランスフェクション実験を行っている。 (6)ALD遺伝子変異解析:2例のALD患者の変異部位とALD蛋白の不安定性に関連があることを報告した。 (7)ALD保因者診断法、マススクリーニング法の開発について報告した。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Suzuki Y.et al.: "Use of buccal smears for rapid detection of peroxisomes." Eur.J.Pediatrics. 156. 250-250 (1997)
[Publications] Suzuki Y.et al.: "Biochemical and immunocytochemical properties of peroxisomes and mitochondria in bovine chromaffin cells." Cell Structure and Function. 22. 615-619 (1997)
[Publications] Imamura A et al.: "Two novel missense mutations in the ATP-binding domain of the adrenoleukodystrophy gene:immunoblotting and immunocytological study of two patients." Clinical Genetics. 51. 322-325 (1997)
[Publications] Inoue K et al: "Very long chain fatty acid analysis of dried blood spots on filter paper to screen for adrenoleukodystrophy." Clinical Chemistry. 43. 2197-2198 (1997)
[Publications] Suzuki Y et al: "D-3-hydroxyacyl-CoA dehydratase/D-3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase bifunctional protein deficiency:a newly identified peroxisomal disorder." Am.J.Hum Genet. 61. 1153-1162 (1997)
[Publications] Inoue K et al: "Carrier identification of X-linked adrenoleukodystrophy by measurement of very long chain fatty acids and liqnoceric acid oxidation." Clinical Genetics. 50. 348-352 (1996)
[Publications] Suzuki Y et al: "Clinical Studies in Medical Biochemistry" Oxford University Press, 380 (1997)
[Publications] Suzuki Y et al: "Peroxisomes:Biology and role in toxicology and disease." The New York Academy of Sciences., 801 (1996)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

副腎白質ジストロフィーの発症機構に関する研究

Principal Investigator

鈴木 康之 岐阜大学, 医学部, 助教授 (00163014)

Research Products

[Publications] Suzuki Y.et al.: "Use of buccal smears for rapid detection of peroxisomes." Eur.J.Pediatrics. 156. 250-250 (1997)

[Publications] Suzuki Y.et al.: "Biochemical and immunocytochemical properties of peroxisomes and mitochondria in bovine chromaffin cells." Cell Structure and Function. 22. 615-619 (1997)

[Publications] Imamura A et al.: "Two novel missense mutations in the ATP-binding domain of the adrenoleukodystrophy gene:immunoblotting and immunocytological study of two patients." Clinical Genetics. 51. 322-325 (1997)

[Publications] Inoue K et al: "Very long chain fatty acid analysis of dried blood spots on filter paper to screen for adrenoleukodystrophy." Clinical Chemistry. 43. 2197-2198 (1997)

[Publications] Suzuki Y et al: "D-3-hydroxyacyl-CoA dehydratase/D-3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase bifunctional protein deficiency:a newly identified peroxisomal disorder." Am.J.Hum Genet. 61. 1153-1162 (1997)

[Publications] Inoue K et al: "Carrier identification of X-linked adrenoleukodystrophy by measurement of very long chain fatty acids and liqnoceric acid oxidation." Clinical Genetics. 50. 348-352 (1996)

[Publications] Suzuki Y et al: "Clinical Studies in Medical Biochemistry" Oxford University Press, 380 (1997)

[Publications] Suzuki Y et al: "Peroxisomes:Biology and role in toxicology and disease." The New York Academy of Sciences., 801 (1996)

鈴木康之岐阜大学, 医学部, 助教授 (00163014)