1996 Fiscal Year Annual Research Report
肥満遺伝子過剰発現トランスジェニックマウスの開発-肥満遺伝子の臨床的意義の解明-
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08671153
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
細田 公則 京都大学, 大学院・人間・環境学研究科, 助手 (40271598)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉政 康直 京都大学, 大学院・医学研究科, 助手 (00252437)
西 重生 京都大学, 大学院・医学研究科, 助手 (80218099)
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| Keywords | 肥満遺伝子 / レプチン / 肥満 / トランスジェニックマウス |
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| Research Abstract |
肥満遺伝子(レプチン遺伝子)の臨床的意義を明らかにする目的でレプチン過剰発現トランスジェニックマウスの作製を試みた。レプチンのマウスcDNAを肝臓特異的なSerum amyloid component P(SAP)遺伝子プロモーターの下流につなぎ、BDF_1マウスの受精卵へマイクロインジェクトし、産まれたマウスについて、サザンブロット解析を行い、8-30コピーのトランスジーンを含むF_0トランスジェニックマウスを得た。眼窩静脈より採血し、血漿を分離して、マウスレプチンに特異的なラジオイムノアッセイで測定された血漿レプチン濃度は、正常マウスで約10ng/mlであるのに対し、トランスジェニックマウスで約80-300ng/mlであり、トランスジーンのコピー数にほぼ比例して上昇しており、トランスジェニックマウスにおけるレプチン過剰発現が明らかになった。レプチン過剰発現トランスジェニックマウスおよび同腹の対照マウスで毎週に体重測定を行ったところ、レプチン過剰発現トランスジェニックマウスで体重の低い傾向が認められた。これらF_0トランスジェニックマウスをB6マウスと交配し、F_1トランスジェニックマウス、さらにF_2トランスジェニックマウスが得られ、同様な低い体重の傾向が認められた。トランスジェニックマウスにおいてマウスの行動や生殖能力について異常は観察されない。以上より、レプチン過剰発現トランスジェニックマウスの確立に成功した。現在トランスジェニックマウスの数を増やし、体重、摂餌量について統計的に解析しており、また他の遺伝性肥満マウスと交配を行い、レプチンの肥満における意義について検討している。
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[Publications] H.Masuzaki: "Augmented expression of obese(ob) gene during the process of obesity in genetically obese-hyperglycemic Wistar fatty(fa/fa)rats" FEBS Letters. 378. 267-271 (1996)
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[Publications] K.Hosoda: "Development of radioimmunoassay for human leptin" Biochem.Biophys.Res.Commun.234-239 (1996)
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[Publications] M.Hayase: "Regulation of obese gene expression in KKmice and congenic lethal yellow obese KKAymice" Am.j.physiol.271. E333-E339 (1996)
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[Publications] K.Takaya: "Molecular cloning of rat leptin isoform complementary DNAs-Identification of a missense mutation in Zucker fatty(fa/fa)rats" Biochem.Biophys.Res.Commun.225. 75-83 (1996)
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[Publications] K.Takaya: "Nonsense mutation in the obese spontaneously hypertensive rat(Koletsky rat)" Nature Genetics.14. 130-131 (1996)
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[Publications] N.Satoh: "Pathophysiological significance of the obese gene product,leptin,in ventromedial hypothalamus(VMH)-lesioned rats:evidence for loss of its satiety effect in VMH-lesioned rats" Endocinology.138. 947-954 (1997)
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[Publications] N.Satoh: "The arcuate nucleus as a primary site of satiety effect of leptin in rats" Neuroscience Letters.(in press). (1997)
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[Publications] J.Hiraoka: "Augmentation of obese(ob)gene expression and leptin secretion in obese spontaneously hypertensive rats(obese SHR or Koletsky rat)" Biochem Biophys.Res.Commu.(in press). (1997)
