1997 Fiscal Year Annual Research Report

2型および5型ソマトスタチン受容体遺伝子のノックアウトマウスの作製とその解析

Research Project

Project/Area Number	08671162
Research Institution	KOBE UNIVERSITY
Principal Investigator	阿部廣己神戸大学, 医学部, 助教授 (20159437)
Keywords	ソマトスタチン / ソマトスタチン受容体 / ノックアウトマウス / GHRH / 成長ホルモン / 下垂体 / 視床下部
Research Abstract	平成9年度はまづ、PCRによる5型ソマトスタチン受容体のゲノムDNA断片のサブクローニングをおこなった。前年度とは異なったプライマーセットを用いたところ、約4.2KbのDNAが増幅され両端からのシークエンスの結果約0.2Kbの5'側領域を含む5型ソマトスタチン受容体のゲノムDNAの一部であることを確認した。蛋白コード部にNeoカセットを挿入しp MCtkベクターにサブクローニングした。先に作成した2型ノマトスタチン受容体をいれたベクターと共にES細胞にトランスフェクションしてNeo耐性ついでアクシロビルで遺伝子導入クローンを選別した。この段階で35クローンが得られた。さらに相同組み替え確認のため相同組み替え部の外側にプライマーを設定し、PCRを行ったところ35クローン中3クローン(2型ソマトスタチン受容体組み替え2クローン、5型ソマトスタチン受容体組み替え1クローン)で期待された相同組み替えが確認された。さらにSouthern Blot法によっても相同組み替えを確認した。この3クローンをマウス胚に注入し毛皮の色から判定してヘテロ接合体マウスがえられた。このマウスを交配してホモ接合体マウスを作ろうと試みたが、F1ではホモ接合体マウスは得られず野性型とヘテロ接合体のみであった。この原因としてF0の生殖細胞でヘテロ接合生殖細胞がなかった可能性が大きいが他の原因も含めて検討中である。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] K Iida, H Abe K Chihara et al: "Growth hormone(GH)insensitivity syndrome with high serum GH-binding protein levels caused by a hoterozygous splice site mutation of the GH receptor gene producing a lack of intracellular domain" J Clin Endocrinol Metab. 83. 531-537 (1998)
[Publications] H Kaji, H Abe K Chihara et al: "Novel compound heterozygous mutations of growth hormone(GH) receptor gene in a patient with GH insensitivity syndrome" J Clin Endocrinol Metab. 82. 3705-3709 (1997)
[Publications] Y Takahashi, H Abe K Chihara et al: "Biologically inactive growth hormone caused by an amino acid substitution" J Clin Invest. 100. 1159-1165 (1997)
[Publications] Y Takahashi, H Abe K Chihara et al: "Leptin induces mitogen-activated protein kinase-dependent proliferation of C3H10T1/2 cells" J Biol Chem. 272. 12897-12900 (1997)
[Publications] Y Takahasshi, H Abe K Chihara et al: "Leptin induces tyrosine phosphorylation of cellular proteins including STAT-1 in human renal adenocarcinoma cells,ACHN" Biochem Biophys Res Commun. 228. 859-864 (1996)
[Publications] K Iida, H Abe K Chihara et al: "Adrenocorticotropin-independent macronodular adrenal hyperplasia in a patient with lysine vasopressin responsiveness but insensitivity to gastric inhibitory polypeptide" Clin Endocrinol. 47. 739-745 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

2型および5型ソマトスタチン受容体遺伝子のノックアウトマウスの作製とその解析

Principal Investigator

阿部 廣己 神戸大学, 医学部, 助教授 (20159437)

Research Products

[Publications] K Iida, H Abe K Chihara et al: "Growth hormone(GH)insensitivity syndrome with high serum GH-binding protein levels caused by a hoterozygous splice site mutation of the GH receptor gene producing a lack of intracellular domain" J Clin Endocrinol Metab. 83. 531-537 (1998)

[Publications] H Kaji, H Abe K Chihara et al: "Novel compound heterozygous mutations of growth hormone(GH) receptor gene in a patient with GH insensitivity syndrome" J Clin Endocrinol Metab. 82. 3705-3709 (1997)

[Publications] Y Takahashi, H Abe K Chihara et al: "Biologically inactive growth hormone caused by an amino acid substitution" J Clin Invest. 100. 1159-1165 (1997)

[Publications] Y Takahashi, H Abe K Chihara et al: "Leptin induces mitogen-activated protein kinase-dependent proliferation of C3H10T1/2 cells" J Biol Chem. 272. 12897-12900 (1997)

[Publications] Y Takahasshi, H Abe K Chihara et al: "Leptin induces tyrosine phosphorylation of cellular proteins including STAT-1 in human renal adenocarcinoma cells,ACHN" Biochem Biophys Res Commun. 228. 859-864 (1996)

[Publications] K Iida, H Abe K Chihara et al: "Adrenocorticotropin-independent macronodular adrenal hyperplasia in a patient with lysine vasopressin responsiveness but insensitivity to gastric inhibitory polypeptide" Clin Endocrinol. 47. 739-745 (1997)

阿部廣己神戸大学, 医学部, 助教授 (20159437)