1996 Fiscal Year Annual Research Report
白血病に関わる染色体転座部位の構造解析による転座メカニズム研究
| Project/Area Number |
08671225
|
|---|
| Research Institution | Nagoya University |
|---|
Principal Investigator |
直江 知樹 名古屋大学, 医学部, 助教授 (50217634)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大林 包幸 名古屋大学, 医学部, 医員
市橋 卓司 名古屋大学, 医学部, 医員
北村 邦朗 名古屋大学, 医学部, 医員
堀部 敬三 名古屋大学, 医学部, 講師 (30209308)
|
|---|
| Keywords | 転座メカニズム / 染色体転座 / 急性前骨髄球性白血病 / 治療関連二次性白血病 |
|---|
| Research Abstract |
治療関連二次性白血病の発症メカニズムを研究する目的で、治療関連二次性急性前骨髄球性白血病(T-sAPL)での染色体転座t(15;17)におけるPMLおよびRARA遺伝子切断点を解析し、de novo APLでの切断点と比較した。対象はJALSGおよび厚生省白血病治療班に登録された成人de novo APL120例およびランゲルハンス細胞組織球症(LCH)診断後、T-sAPLを発症した4例(男1例、女3例、平均年齢3.1歳)で、いずれもt(15;17)転座を有していた。LCHからT-sAPL発症までの期間は3〜8.5年でVP16総投与量4.8〜50.0g/m^2であった。de novo APLではPML遺伝子切断部位は約30%がイントロン3に、約70%がイントロン6・エクソン6に存在し、RARA遺伝子切断部位はすべてイントロン2存在した。8例においてder(15)およびder(17)の連結領域をシークエンスしたところ、共通する塩基モチーフを見出すことは困難であった。しかし、半数以上の連結部位においてPML遺伝子とRARA遺伝子が1〜7塩基を共有していることから、再結合モデルとして、非特異的なDNA二重鎖切断に続いて突出した一本鎖DNAどうしのペアリングが起きてDNAの結合に進む過程が考えられた。一方、T-sAPLの4症例の切断点は、サザンプロットの結果いずれもPML遺伝子のイントロン6、RARA遺伝子のイントロン2(EcoR1-BamH1の1.1kb)にあると予想された。つぎにPCRを行い切断領域を含むRARA-PMLおよびPML-RARA融合遺伝子のクローニングを行なった。その結果、4例とも約5.5kbのDNA増幅され、Eco R1で処理したところ、3.5kb、0.7kb、0.3kbの共通なbandの他に1.0〜2.1kbの異なる大きさのbandが検出された。各症例のder(15)のシークエンスが終了し、現在der(17)及びRARA遺伝子ゲノムクローンのシークエンスを行っているが、これまでのシークエンスでは転座部位に共通する塩基モチーフを見出すことは困難であったが、T-sAPLの発症メカニズムはde novo APLとは異なると考えられた。
|
-
[Publications] O.Marukawa et al.: "Molecular cloning of the breakpoints of t(11;22)(q23;q11) chromosome translocation in an adult acute myelomonocytic leukemia" Brit J Haemat. 92. 687-691 (1996)
-
[Publications] K.kubo et al.: "Differently selected T cell receptor repertoires between lesions and peripheral blood in acute graft-versus-host disease" Blood. 87. 3019-3026 (1996)
-
[Publications] H.Kiyoi et al.: "Comparable gene structure of the immunoglobulin heavy chain variable region between normal and malignant plasma cells" Leukemia. 10. 1804-1812 (1996)
-
[Publications] T.Naoe et al.: "Molecular analysis of the t(15;17) traslocation in de novo and secondary acute promyelocytic leukemia" Leukemia. (in press).
-
[Publications] H.Yoshida et al.: "Accelerated degradation of PML-RARA oncoprotein by all-trans retinoic acid acute promyelocytic leukemia : possible role of the proteasome pathway" Cancer Res. 56. 2945-2948 (1996)
-
[Publications] G.Chen et al.: "In vitro studies on cellular and molecular mechanism of arsenic trioxide (As2O3) in the treatment of acute promyelocytic leukemia : As3O3 induces NB4 cell apoptosis with down-regulation of Bcl-2 expression and alteration of PML-RARa/PML protein localization" Blood. 88. 11052-1061 (1996)
