1996 Fiscal Year Annual Research Report
血栓症の危険因子である高Lp(a)血症の治療薬のスクリーニングと作用機序の解明
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08671237
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
東 博之 徳島大学, 医学部・附属病院, 助手 (10241275)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
重清 俊雄 徳島大学, 医学部・附属病院, 講師 (50162582)
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| Keywords | リポプロテイン(a) / アポリポプロテイン(a) / 高脂血症 / 転写活性 / IL-6 / ATRA |
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| Research Abstract |
リポプロテイン(a)[Lp(a)]の血中濃度の増加は動脈硬化発症の独立した危険因子であり、その血中濃度は主に肝でのアポプロテイン(a)[apo(a)]産生量に依存している。しかし血中Lp(a)を特異的にかつ十分に低下させうる薬剤は少ない。我々は、in vitroでapo(a)遺伝子のプロモーター領域を有するルシフェラーゼレポータープラスミドを作製し、apo(a)の転写活性に影響を及ぼす薬剤、または生理活性物質をスクリーニングした。さらにin vivoでのLp(a)濃度に及ぼす効果についても検討した。apo(a)遺伝子プロモーター領域の-4番から-444番をPCR法で増幅し、Hind III/Xho Iで切断後、pBS/KSのHind III/Xho I部位に挿入した。さらにSma I/Xho Iで切断後、ルシフェラーゼレポーターであるpGL2/Basic(Promega社)のSma I/Xho I部位に挿入しapo(a)の転写解析プススミドを作製した(pGL2/apo/-444)。HepG2細胞を用い、pGL2/Basic及びpGl2/apo/-444プラスミドをトランスフェクション後、各種薬剤を加え、さらに48時間培養した。ルシフェラーゼ活性は1253ルミノメーター(Bio-Orbit社)で測定した。All-trans-retinoic acid(ATRA)とinterleukin-6はapo(a)遺伝子のプロモーターの転写活性をそれぞれ2.1倍、2.5倍増加させたが、danazolはその活性を24%低下させた。Triiodothyronineは影響を与えなかった。急性前骨髄性白血病患者2例の血清Lp(a)濃度はATRAを用いた分化療法により、最高2.7倍及び3.2倍それぞれ増加した。
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