1996 Fiscal Year Annual Research Report

外科手術後病態の治療に関する実験的研究:アンチセンスアデノウイルスベクターによる血管内皮細胞の活性化制御について

Research Project

Project/Area Number	08671385
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Research Institution	Showa University
Principal Investigator	山口真彦昭和大学, 医学部, 助手 (00266149)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	竹田稔昭和大学, 医学部, 教授 (50110896) 熊田馨昭和大学, 医学部, 教授 (00025602)
Keywords	血管内皮細胞 / アデノウイルスベクター / アンチセンス / PDGF-A鎖 / ICAM-1
Research Abstract	外科手術に伴う病態の形成には活性化された血管内皮細胞から産生されるさまざまな因子が関与している。本研究では活性化内皮細胞の発現する接着分子(特にICAM-1)および増殖因子(特にPDGF-A鎖)に着目し、そのmRNAに対するアンチセンスアデノウイルスベクターを作成してそれぞれの因子産生を抑制することを研究の目的としている。アンチセンスアデノウイルスベクターの作成については、まずTNFαで刺激したヒト血管内皮細胞から細胞内RNAを取り出し、逆転写反応でcDNAを作ったのち、ICAM-1,VCAM-1,E-selectin,PDGF-A chain子のcDNAを特異的なプライマーを用いたPCR法で増幅し、そのPCR産物をプラスミッドの中に組み入れてサブクローニングして、制限酵素消化およびシークエンシングなどで塩基配列を確認した。現在はアデノウイルスベクター作成に必要なコスミッドベクターへの組み入れを行ったところである。今後は293細胞での相同組み換え反応を利用し、それぞれmRNAに対するアンチセンスアデノウイルスベクターを作成する。さらに内皮細胞にアンチセンスアデノウイルスベクターを導入し、サイトカイン刺激で増強される内皮細胞の当該分子発現の抑制を検討する予定である。われわれはラットの肝虚血再潅流傷害モデルにおいて抗ICAM-1抗体が傷害を抑制することを報告し、またカルシウムブロッカーがVCAM-1の発現を選択的に抑制することを示して臓器移植における拒絶反応抑制の一因と報告したが、今後さらにラットを用いて病態モデルを作成し、アンチセンスアデノウイルスベクターの効果の検討を進める予定である。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Kumada K,et al.: "Amelioration of hepatocellular integrity and inhibition of sinusoidal oxidative stress by N-acetylcysteine pretreatment in cold ischemia-reperfusion injury of rat liver." Eur Surg Res. 28. 245-255 (1996)
[Publications] Kumada K,et al: "Histopathological response to preoperative chemotherapy including 5-fluorouracil additionally assessed by immunocytochemical and pharmacologic parameters in advanced gastric cancer patients." Surg Today. 26. 482-488 (1996)
[Publications] Yamaguchi M,et al.: "Selective Inhibition of vascular cell adhesion molecule-1 expression in human vascular endothelial cells" Transplantation. 63. 1-6 (1997)
[Publications] Yamaguchi M,et al.: "Prediction of postoperative decompensated liver function by technetium 99m galactosyl human serum albumin liver scintigraphy in patients with hepatocellular carcinoma" Br J Surg in press.
[Publications] Yamaguchi M,et al.: "A monoclonal antibody against ICAM-1 suppressed hepatic ischemia-reperfusion injury." Eur Surg Res. 29. 93-100 (1997)
[Publications] Yamaguchi M,et al.: "Heparin-like glycosaminoglycans inhibit leukocyte adhesion to endotoxin-activated human vascular endothelial cells under nonstatic conditions." Eur Surg Res. 28. 428-435 (1996)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

外科手術後病態の治療に関する実験的研究:アンチセンスアデノウイルスベクターによる血管内皮細胞の活性化制御について

Principal Investigator

山口 真彦 昭和大学, 医学部, 助手 (00266149)

Research Products

[Publications] Kumada K,et al.: "Amelioration of hepatocellular integrity and inhibition of sinusoidal oxidative stress by N-acetylcysteine pretreatment in cold ischemia-reperfusion injury of rat liver." Eur Surg Res. 28. 245-255 (1996)

[Publications] Kumada K,et al: "Histopathological response to preoperative chemotherapy including 5-fluorouracil additionally assessed by immunocytochemical and pharmacologic parameters in advanced gastric cancer patients." Surg Today. 26. 482-488 (1996)

[Publications] Yamaguchi M,et al.: "Selective Inhibition of vascular cell adhesion molecule-1 expression in human vascular endothelial cells" Transplantation. 63. 1-6 (1997)

[Publications] Yamaguchi M,et al.: "Prediction of postoperative decompensated liver function by technetium 99m galactosyl human serum albumin liver scintigraphy in patients with hepatocellular carcinoma" Br J Surg in press.

[Publications] Yamaguchi M,et al.: "A monoclonal antibody against ICAM-1 suppressed hepatic ischemia-reperfusion injury." Eur Surg Res. 29. 93-100 (1997)

[Publications] Yamaguchi M,et al.: "Heparin-like glycosaminoglycans inhibit leukocyte adhesion to endotoxin-activated human vascular endothelial cells under nonstatic conditions." Eur Surg Res. 28. 428-435 (1996)

山口真彦昭和大学, 医学部, 助手 (00266149)