脳腫瘍遺伝子治療にアデノウイルスベクターを利用したインデグリンα_3中和抗体の発現

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08671577
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 青木 友和 京都大学, 医学研究科, 助手 (50273454)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 宮武 伸一 京都大学, 医学研究科, 講師 (90209916) ; 高橋 潤 京都大学, 医学研究科, 助手 (80252435)
• Keywords: 脳腫瘍 / インテグリン / モノクローナル抗体 / 遺伝子治療

Research Abstract

我々は、グリオーマ特異的モノクローナル抗体を樹立し、その後、その抗体が認識するタンパク質を精製し、マイクロシークエンス法にて、N末端より25アミノ酸残基を決定した。そして、それがインテグリンα_3であることが判明した。そして、human integrinn α_3のcDNAを東大薬学部辻本先生より供与していただき、各種腫瘍組織にて、northem blot、western blot、そして、immunohistochemistryを施行したところ、グリオーマでかなり強く発現しているのを確認した。
我々の樹立したグリオーマ特異的モノクローナル抗体(GA17)は、integrin α_3の中和抗体である可能性もあり、現在、in vitroでグリオーマ細胞の接着を阻害しアポトーシスを誘導するか確認しているところである。
また、northem blotの過程で、インテグリンα_3のexpected bandと更に短いバンドで出現した。それは、悪性度と比較している様にも思われた。
現在、PCRにて、そのsplice variantと予想しているbandをcDNAより、cloningし、sequenceして、どの部分がdeletionを受けているか、そのことによって、リン酸化部位がどのように影響を受け、シグナル伝達がどのように変化し、gliaがgliomaになるのか解析しているところである。