1998 Fiscal Year Annual Research Report
子宮内膜癌の発癌進展過程における遺伝子発現の変異についての研究
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08671857
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
藤野 敬文 北海道大学, 医学部付属病院, 講師 (20209076)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
藤本 征一郎 北海道大学, 医学部, 教授 (60001898)
古田 伊都子 北海道大学, 医学部, 助手 (70238682)
山田 秀人 北海道大学, 医学部付属病院・助手, 助手 (40220397)
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| Keywords | 子宮内膜癌 / endometrial carcinoma / northern blotting / differential display |
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| Research Abstract |
子宮内膜癌の発癌・進展課程にどのような遺伝子変異が関与するかを明らかにするために,悪性化に至る種々の段階の子宮内膜病変組織,異なった分化度の内膜癌組織における遺伝子変化の差異を検出することを目的とした.このために簡便かつランダムにmRNAの差異を比較できるdifferential display法を用いることとした.手術材料の収集と並行して基礎的検討を行った.アスベストあるいはdiethylstilbestrolによってトランスホームした造腫瘍性のないSyrian hamster embryo細胞株のうちEGF,PDGF,Insulinの添加条件下でAnchorage-Independentな増殖可能なクローン10Wsup+,DES4sup+と増殖不可能なクローン10Wsup-,DES4sup-との発現の差異の検出を試みた.各細胞株よりmRNAを抽出し4種類のpolyA+側プライマーと20種類のランダムプライマーを用いPCRを行った.PCR産物をシークエンスゲルにより電気泳動を行いsup+群,sup-群に共通する差異を比較した.sup+群に陽性でsup-群に陰性なバンドをゲルから切り出しDNAを抽出しPCRで増幅した後これをプローブとして各細胞株mRNAのノーザンハイブリダイゼーションを行った.このうち一つのプローブはsup+群に陽性でsup-群に陰性と明瞭な差異が認められたのでこれのシークエンスを行ったところtype2 collagenであった.方法の有効性は確認されたので手術材料による検討を行った.正常子宮内膜,子宮内膜増殖症,子宮内膜腺癌かmRNAを抽出し,同様の方法にてPCRを行い,PCR産物をシークエンスゲルにより電気泳動を行い泳動パターンを比較した.正常内膜に存在し子宮内膜癌に存在しないバンドをのうち4個のバンドを切り出して再び増幅しノーザンハイブリダイゼーションにて検討を行ったが現在の所明らかな差を認めていない.引き続き他の増幅産物について検討の余地がある.
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[Publications] Sakuragi N: "Bcl-2 expression and prognosis of patients with endometrial carcinoma." Int.J.Cancer. 79(2). 153-158 (1998)
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[Publications] Tsumura N: "Distribution pattern and factors of pelvic and para-aortic lymph node metastasis in epithelial ovarian cancer." Int.J.Cancer. 79(5). 526-530 (1998)
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[Publications] Nishiya M: "Cox multivariate regression models for estimating prognosis of patients with endometrioid adenocarcinoma of the uterine corpus who underwent through surgical staging." Int.J.Cancer. 79(5). 521-525 (1998)
