1998 Fiscal Year Annual Research Report
子宮頚癌の細胞分化にともなうヒトパピローマウイルス癌遺伝子発現機構の解明
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08671876
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
京 哲 金沢大学, 医学部・附属病院, 助手 (50272969)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
井上 正樹 金沢大学, 医学部, 教授 (10127186)
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| Keywords | HPV / 子宮頚癌 / 細胞分化 / 転写因子 |
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| Research Abstract |
ヒト重層扁平上皮細胞に感染したヒトパピローマウイルス(HPV)の遺伝子発現を制御する細胞因子を同定するために、まずHPV type 31を用いてtransient expression assayによるHPV promter-enhancerの同定を試みた。その結果HPV long control regionの中央部約260bpのenhancer領域を同定した。続いてこのenhancerに結合する核内蛋白をDNA-protein binding assay(Footprint analysis,Gel shift assay)により解析したところ、癌遺伝子産物AP1、未同定の蛋白F1、F2、F5および転写因子Oct-1が結合することが判明した。mutation assayにより、この中でHPVpromoterの転写にcriticalな因子を検討したところ、AP1が最も重要な転写調節因子であることが判明した。続いてraft cutureによりHPV31 genomeをepisome状態で含有する細胞を重層培養し、AP1の局在を免疫組織染色で確認したところ、重層扁平上皮の基底および傍基底細胞層に発現を認めた。in situ hybridization法でHPVの癌遺伝子産物であるE6、E7のmRNAの発現を確認したところ、AP1の局在とほぼ一致した基底層、傍基底層に発現を認めた。以上のことからHPVの遺伝子発現には細胞性因子AP1の発現が重要なdeterminantであることが明らかになった。AP1の発現はHPVの細胞種特異性を決定する因子のひとつであると考えられる。さらに我々はlong control regionのより上流に新たなenhancerを同定し、この領域に結合しAP1との共同作用でHPV遺伝子発現を活性化する因子YY1を特定した。以上よりAP1とYY1二つの核内蛋白をtargetにした子宮頚癌の遺伝子治療の可能性が示唆された。
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Research Products
(2 results)
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[Publications] Satoru Kyo,David Klnmrl,Masaki Inoue,etal: "Expression of AP1 during cellular differentiation determines human papillomarins E6/E7 expression in stratified egiphelinl alls" Journal of General Virology. 78. 401-411 (1997)
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[Publications] Tan Kanaya,Satoru Kyo Laimoms A Lamms: "The 5'resion of the human papilloma virus type 31 inpstream regnlatory region acts as an enhace which Angments viral emly expression through the action of YY_1" Virology. 237. 159-169 (1997)
