1996 Fiscal Year Annual Research Report
血漿中スフィンゴシン-1ーリン酸測定の臨床検査への応用
| Project/Area Number |
08672635
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
| Research Institution | 山梨医科大学 |
|---|
Principal Investigator |
矢冨 裕 山梨医科大学, 医学部, 助手 (60200523)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 金夫 山梨医科大学, 医学部, 教務職員 (20242662)
尾崎 由基男 山梨医科大学, 医学部, 助教授 (30134539)
|
|---|
| Keywords | スフィンゴシン-1ーリン酸 / スフィンゴシン / 血漿 / 血小板 |
|---|
| Research Abstract |
(1)臨床検体を用いた,血漿中Sph-1-Pの定量
我々が最近開発したスフィンゴシン-1ーリン酸(Sph-1-P)定量法(Anal.Biochem.230:315-320,1995),つまり,^3H標識無水酢酸によりN-アセチル化することにより(これにより、^3H標識C_2-セラミド-1ーリン酸が生成される),健常人の血漿Sph-1-Pの測定を行った.血漿中には,191±79pmol/ml(平均±標準偏差,n=8)の濃度でSph-1-Pが存在することが判明した.
(2)Sph-1-P測定法の改良
大量の検体のSph-1-P測定を速やかに行えるように,^3H標識C_2-セラミド-1ーリン酸をHPLCにより解析できる系を工夫した.シリカゲル-オクタデシル基充填カラムを用いた逆相分配クロマトグラフィーにより,標準Sph-1-Pの測定は可能になっている.しかし,まだ感度が悪く,血漿検体を測定できるまでには至っていない.次年度の課題としたい.
(3)血漿Sph-1-Pの代謝
血小板よりスフィンゴシンキナーゼを部分精製し,市販の^3H標識スフィンゴシンを基質として反応させることにより,^3H標識Sph-1-Pを作成した.このアイソトープ標識Sph-1-Pの血漿中での代謝を検討したところ,極めて安定であることが判明した.
|
