1996 Fiscal Year Annual Research Report
環境中の低レベル変動磁場長時間曝露による細胞動態の解析
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08680569
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
宮越 順二 京都大学, 医学研究科, 助教授 (70121572)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
平岡 真寛 京都大学, 医学研究科, 教授 (70173218)
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Keywords | 変動磁場 / 培養細胞 / 遺伝子発現 / c-myc遺伝子 / シグナル伝達 |
Research Abstract |
細胞実験用低レベル極低周波変動磁場(ELF)装置を用いた。同一の装置をさらに一台作製し対照実験として用いている。これらの装置を用いて長時間の培養が可能であることを確認した。低レベルELFによる遺伝子発現誘発ならびに細胞増殖や分化への影響に関して以下のように解析を行なった。ラット褐色細胞腫由来の培養細胞(PC12-VG)を用いた。この細胞にはヒトVIP(vasoactive intestinal peptide)遺伝子のプロモーターとベータガラクトシダーゼ遺伝子を結合したキメラ遺伝子が導入してあり、フォルスコリンをリガンドとしてサイクリックAMPを介したシグナル伝達により高感度に遺伝子発現を検出できることを確認している。5mTの磁場密度で、径時的にPC12-VG細胞のベータガラクトシダーゼ活性を測定した。対照として、非磁場曝露の同装置を用いてベータガラクトシダーゼ活性を測定した。その結果、400mTの超高磁束密度の磁場曝露で認められたベータガラクトシダーゼ活性の上昇が、5mTの曝露では観察されなかった。国外では一部の初期応答遺伝子群について、変動磁場曝露により発現の増強が報告されている。次に、初期応答遺伝子群の1つであるc-mycの発現挙動をCHO-K1細胞を用いて、5mT磁場曝露で検討した。その結果、ノーザンブロットで調べたc-mycの遺伝子発現は磁場曝露と対照で有意な差は見られなかった。従って以上の結果から、5mT程度の磁場密度による曝露では細胞の遺伝子発現に大きな影響を与えないものと考えられる。
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[Publications] Shuji Ohtsu: "Enhancement of β-galactosidase gene expression in rat pheochromocytoma cells by exposure to extremely low frequency magnetic fields." Biochemical and Biophysical Research Communications. 212. 104-109 (1995)
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[Publications] Junji Miyakoshi: "Exposure to 50 Hz magnetic field enhances β-galactosidase activity in rat PC12-VG cells." Journal of Japanese Society of Applied Electromagnetics and Mechanics. 3. 52-56 (1995)
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[Publications] Junji Miyakoshi: "Increase in hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transferase gene mutations by exposure to high-density 50 Hz magnetic fields." Mutation Research. 349. 109-114 (1996)
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[Publications] Junji Miyakoshi: "Exposure to magnetic field(5mT at 60 Hz)does not affect cell growth and c-myc gene expression." Journal of Radiation Research. 37. 185-191 (1996)
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[Publications] Junji Miyakoshi: "Increased radiosensitivity of p16 gene-deleted human glioma cells after transfection with wild-type p16 gene." Japanese Journal of Cancer Research. (印刷中).
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[Publications] Junji Miyakoshi: "Mutation induction by high-density 50 Hz magnetic fields in human MeWo cells exposed in the DNA synthesizing phase." International Journal of Radiation Biology. (印刷中).