1997 Fiscal Year Annual Research Report
酵母細胞周期M期への誘導因子に関する分子遺伝学的研究
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08680736
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
菊地 淑子 東京大学, 大学院・理学系研究科, 助教授 (00138124)
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| Keywords | 細胞周期M期移行 / ユビキチンリガーゼ / cdc20 / 熱ショック応答 / ストレス応答 |
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| Research Abstract |
出芽酵母ユビキチンライゲ-スをコードするTOM1温度感受性変異株は高温下で細胞周期M期への移行欠損の他、mRNAの核外輸送、核小体やスピンドルの形態異常が観察された。さらにSTRE-エレメント依存的ストレス応答に欠損があることが分かった。tom1変異株が、制限温度35℃で増殖できるようになった偽復帰変異株tmrを単離し7相補群に分類した。cyr1(アデニレートシクラーゼ)、sch9(Aキナーゼ類似キナーゼ)、mot1(転写リプレッサー)、msi3(熱ショック蛋白)、cdc55(フォスファターゼ2A調節サブユニット)、zuo1(Z-DNA,tRNA結合蛋白)、kre6(グルカン合成)を同定した。また、PDE2(フォスフォジエステラーゼ)がマルチコピーサプレッサーとなることからRAS-cAMP経路の活性を下げることによってtom1変異を抑圧できることが分かった。このことはSTRE-エレメント依存的ストレス応答がRAS-cAMP経路の活性を下げると活性化することから説明される。cdc55とzuo1はcdc20の復帰変異としても単離され、cdc20toml 2重変異株が30度で増殖できないことから、Toml蛋白とM期で必要なAPCユビキチンライゲ-スとの遺伝的関連が示唆された。また、Toml蛋白と直接相互作用する蛋白を検索するため、Two-hybrid法を行い、単離された遺伝子について性格ずけを行った。ユビキチンライゲ-ス領域にはユビキチンや、ユビキチン様ドメインを持つRad23が単離された。また、蛋白分解複合体であるプロテアソームの調節サブユニット因子も2種単離された。蛋白分解の標識であるユビキチン化経路と分解装置とが直接相互作用するケースを示唆している。
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