1996 Fiscal Year Annual Research Report
植物ホルモンオーキシンの情報伝達に関わるMAPキナーゼカスケードの同定
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08740633
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| Research Institution | The Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
溝口 剛 理化学研究所, 植物分子生物学研究室, 基礎科学特別研究員 (70281623)
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| Keywords | MAP.キナーゼ / プロテインキナーゼ / 酵母two-hybrid system |
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| Research Abstract |
我々は昨年までに,高等植物シロイヌナズナから、MAP Kinase cascadeを構成する因子と相同性をもつcDNAを多数単離してきた。そこで我々は、これらのシロイヌナズナMAPK、MAPKK、MAPKKK homologsを用いて、酵母two-hybrid systemによる蛋白質-蛋白質間相互作用の検討、さらに酵母MAP kinase cascades突然変異体に対する相補能の検討を行った。その結果、ATMPK4(MAPK)とAtMEK(MAPKK)の間に蛋白質-蛋白質間相互作用が検出され、ATMPK4とAtMEKをmpkl欠失変異体中で共発現させることにより、これらの突然変異体の機能相補が認められた。また、AtMEK(MAPKK)とATMEKKI(MAPKKK)の間に蛋白質-蛋白質間相互作用が検出され、pbs2欠失変異体中で共発現させることにより機能相補が認められた。さらに、ATMPK4(MAPK)とATMEKK1(MAPKKK)の間にも蛋白質-蛋白質間相互作用が検出された。ATMEKK1(MAPKKK)を用いた欠失実験から、ATMPK4(MAPK)とAtMEK(MAPKK)は、ATMEKK1(MAPKKK)の異なる領域に結合しうることが示唆された。我々はまた、ATMEKK1(MAPKKK)と相互作用する因子をスクリーニングし、3グループの陽性クローンを単離した。塩基配列を決定したところ,グループ1,グループ2,グループ3はそれぞれATMPK4(MAPK),ATMKK2(MAPKK),新規の蛋白質をコードしていることが分かった。以上の結果は、酵母中でATMEKK1(MAPKKK)がAtMEK(MAPKK)を、AtMEK(MAPKK)がATMPK4(MAPK)を活性化しうることを強く示唆している。
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[Publications] Tsuyoshi Mizoguchi: "Environmental stress rosponse in plants : The roie of mitogen-activated protein kinases" Trends in BIOTECHNOLOGY. 15. 15-19 (1997)
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[Publications] 溝口剛: "プロテインキナーゼの種類と特徴" 現代化学増刊.植物のシグナルトランスダクション:分子機構と実験法. 30. 130-139 (1996)
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[Publications] 溝口剛: "環境ストレス応答とプロテインキナーゼ" 現代化学増刊.植物のシグナルトランスダクション:分子機構と実験法. 30. 152-163 (1996)
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[Publications] Tsuyoshi Mizoguchi: "Nater Stress.Indncecl Gones in Arobi dopsis Thaliana" Physical Stresses in Plants : Genes and Their Products for Tolerance. 153-161 (1996)
