1996 Fiscal Year Annual Research Report
新規胆汁酸生合成異常におけるオキソ不飽和胆汁酸の体内動態と酵素化学的研究
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08772067
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| Research Institution | Health Sciences University of Hokkaido |
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Principal Investigator |
吉村 昭毅 北海道医療大学, 薬学部, 講師 (60220737)
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| Keywords | 胆汁酸 / オキソ不飽和胆汁酸 / 5β-レダクターゼ / HPLC / 酵素免疫測定法 / 体内動態 / 生合成酵素異常 / 基質特異性 |
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| Research Abstract |
(1)HPLCによる抱合型オキソ不飽和胆汁酸の一斉分析法の開発
先に開発した二波長同時UV検出法に加え、測定法の高感度化を目的にDansyl hydrazine及び4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-hydrazino-2,1,3-benzoxadiazoleを誘導体化試薬として用いる蛍光検出法について検討した。
(2)オキソ不飽和胆汁酸の酵素免疫測定法の開発
オキソ不飽和胆汁酸(7α-hydroxy-3-oxo-4-cholenoic及び7α,12α-dihydroxy-3-oxo-4-cholenoic acids)の牛血清アルブミン結合物を免疫源として、抗血清を作成し、西洋ワサビペルオキシダーゼ結合物を標識抗原とする2抗体固相法による酵素免疫測定法を開発した。
(3)病態時におけるオキソ不飽和胆汁酸の動態解析
開発した分析法を健常児及び3-oxo-Δ^4-steroid 5β-reductase異常症患児の尿中胆汁酸の分析に応用し、本疾患児におけるオキソ不飽和胆汁酸の体内動態に関する基礎データの集積を行った。
(4)3-oxo-Δ^4-steroid 5β-reductaseの諸性質の解明
胆汁酸の生合成経路において存在が示唆されている各種3-oxo-Δ^4-中間体を合成し、ラット肝より精製した3-oxo-Δ^4-steroid 5β-reductaseの基質特異性について詳細に検討した。
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[Publications] Mikako Suzuki: "Determination of 3-Oxo-Δ^4-and 3-Oxo-Δ^<4,6>-Bile Acids and Related Compounds in Biological Fluids of Patients with Cholestasis by Gas Chromatography-Mass Spectrometry" J.Chromatogr.(in press). (1997)
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[Publications] Teruki Yoshimura: "High-Performace Liquid Chromatographic Determination of Conjugated and Unconjugated 3-Oxo-Δ^4-and 3-Oxo-Δ^<4,6>-Bile Acids in Human Urine" J.Liquid Chromatogr.and Related Technologies. (in press). (1997)
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[Publications] Tsuyoshi Murai: "Determination of Fetal Bile Acids in a Dried Blood Disc from Neonates by Gas Chromatography-Negative Ion Chemical Ionization Mass Spectrometry" J.Mass Spectrom.& Rapid Commun.Mass Spectrom.S205-S206 (1996)
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[Publications] Shigeo Ikegawa: "Enzyme Immunoassay for Conjugated Cholic and 1β-Hydroxycholic Acids in Urine of Early Infancy" J.Immunoassay. 17(2). 105-118 (1996)
