神経細胞におけるPaxillinのチロシンリン酸化とその分子機構

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08780588
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 奥村 宣明 大阪大学, 蛋白質研究所, 助手 (20224173)
• Keywords: 神経生長因子 / リン酸化 / 細胞内情報伝達機構

Research Abstract

私たちはこれまでに、神経栄養因子(NGF)の情報伝達系に、srcファミリーチロシンキナーゼの基質と考えられているPaxillin、及びp130^<cas>のチロシンリン酸化が関与することを明らかにした。この結果から神経細胞の生長にsrcファミリーが関与すると考えた。本研究では、Paxillinをチロシンリン酸化する経路を中心に解析を行った。
1、Paxillinをリン酸化するキナーゼの検出と同定
私たちはPaxillinをリン酸化するキナーゼをPC12細胞、及び脳の抽出液中に見いだし、その同定を試みた結果、pp60c-src、cdk2、cdk4、rskほかのキナーゼがpaxillinをリン酸化することを明らかにした。また、pp60^<c-src>がEGF等によって活性化することを見いだした。
2、Paxillinと結合する蛋白質の同定
GST-Paxillin融合蛋白質を用い、cdk2とcdk4がPaxillinと結合する可能性のあることが示唆する結果を得た。
3、Paxilinの脳における局在
ラット脳の切片を免疫組織化学的に染色し、Paxillinがあらゆる神経細胞に存在すること、またアストロサイトに非常に多いことを見いだした。
以上の結果から、NGFがチロシンキナーゼpp60c-srcを活性化することによって、パキシリンやp130^<cas>のチロシンリン酸化を引き起こすこと、また、他のいくつかのセリン・スレオニンキナーゼがパキシリンをリン酸化することが明らかとなった。

Research Products

• [Publications] Khan MA,Okumura N et al.: "Nerve growth factor stimulates tyrosine phosphorylation of paxillin in PC12h cells." FEBS Lett.362(2). 201-204 (1995)
• [Publications] Matsumine A et al.: "Binding of APC to the human homolog of the Drosophila discs large tumor suppressor protein" Science. 272(5264). 1020-1023 (1996)
• [Publications] Khan MA,Okumura N et al.: "Depolarization-induced tyrosine phosphorylation of paxillin in PC12h cells." Eur.J.Biochem.235・3. 579-584 (1996)