新規LIMファミリー遺伝子,LIM-Kinaseの生体機能解析

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08780708
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 小清水 右一 大阪大学, 医学部, 助手 (50281126)
• Keywords: LIMキナーゼ / LIMドメイン / セリン / スレオニンキナーゼ / 遺伝子クローニング / アフリカツメガエル / 神経発生

Research Abstract

今年度の主な研究成果は以下の通りである.
1.マウスLimk-2遺伝子のクローニングに成功し,その発現様式の検討を行った.マウスLimk-2にはLimk-1遺伝子と同様にLIMドメインを2つ有するもの(″intact″Limk-2)と1番目のLIMドメインを半分欠いているもの(″variant″Limk-2)の2つのアイソタイプ・クローンが存在することを明らかにした.″intact″Limk-2は成体において脳,肝臓,肺をはじめとする様々な組織で発現しているが,″variant″Limk-2は主に脳にのみ発現が認められた.
2.マウスLimk-1,Limk-2遺伝子の胚発生過程における発現様式を検討した.マウスLimk-1,Limk-2はともに発生初期より発現が認められ,in situ hybridization法による解析の結果,8日齢胎児では前腸および後腸,神経摺や心臓原基に,10日齢胎児では脳,脊髄,背根神経節や鰓弓などに特異的なシグナルが見られ,神経発生過程における機能的重要性が示唆された.
3.マウスLimk-1,Limk-2ゲノム遺伝子のクローニングを行った.両遺伝子とも10数個のエクソンが数10Kbにわたって存在しており,互いに良く似た構造をしていた.
4.アフリカツメガエルのLimk-1ホモログ遺伝子(Xlimk1)のクローニングに成功し,その発現様式の検討を行った.Xlimk1遺伝子は発生初期より発現が認められ,特に神経胚後期では脳および各種感覚器原基,鰓弓に強く発現していた.この発現パターンは上述のマウスLimk遺伝子ときわめてよく似ており,種間を越えたLIM kinaseの神経発生過程における機能的重要性が示唆された.

Research Products

• [Publications] U.Koshimizu et al.: "Functional Requirement of gp130-mediated Signaling for Growth and Survival of Primordial Germ Cells in vitro and Derivation of Embryonic Germ (EG) Cells." Development. 122(4). 1235-1242 (1996)
• [Publications] M.Watanabe et al.: "Cene Transfection of Mouse Primordial Germ Cells in vitro and Analysis of Their Survival and Growth Control" Exp.Cell Res.230(1). 76-83 (1997)
• [Publications] T.Takahashi et al.: "The Xenopus LIM Motif-containing Protein Kinase,Xlimkl,Is Exressed in the Developing Head Structure of the Embryo." Dev.Dyn.(印刷中). (1997)
• [Publications] U.Koshimizu et al.: "「Liver and Environmental Xenobiotics」" Narosa-Verlag(in press), (1997)
• [Publications] 小清水右一: "「細胞増殖因子研究の最前線′97-′98」" 羊土社(印刷中), (1997)