1997 Fiscal Year Annual Research Report

顎関節内障病態における関節滑膜細胞の遺伝子発現の変化についての細胞生物学的研究

Research Project

Project/Area Number	08835011
Research Institution	KYOTO UNIVERSITY
Principal Investigator	藤田茂之京都大学, 医学研究科, 講師 (50228996)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	吉田博昭京都大学, 医学研究科, 助手 (40260624) 村上賢一郎京都大学, 医学研究科, 助教授 (00174269)
Keywords	顎関節内障 / 滑膜細胞 / 細胞培養 / ビメンチン / テネイシン / TGF-β
Research Abstract	当教室の外来を訪れた顎関節症患者の内、顎関節手術の対象となった重度症例(顎関節授動術4例、顎関節円板切除術4例、顎関節鏡視下剥離受動術3例)の顎関節滑膜の一部を無菌的に切除し培養を試みた。今日までヒト顎関節滑膜細胞の培養に関する報告は皆無であり、まずその培養条件を確立することを第一目標とした。顎関節から採取できうる滑膜の絶対量は、ひざの滑膜に比較して著しく少量で、そのため膝関節滑膜培養法に準じて滑膜細胞以外の組織を物理的または化学的に除去した場合、ほとんどの症例でわずかの細胞しか残存していない。そこで我々はヒト顎関節滑膜細胞の培養の最適手順を開発した。その設定条件は、培地のみ、5%および10%ウシ血清アルブミン含有培地であった。その結果、培地のみおよび5%ウシ血清アルブミン含有培地の件下で滑膜培養を試みた群では、ほとんど細胞増殖は観察できなかったが、10%ウシ血清アルブミン条件下で滑膜培養を試みた群で38時間経過すると滑膜の増殖が観察できた。この細胞を免疫組織化学的に抗サイトケラチン、抗ビメンチン抗体にて染色したところサイトケラチンに反応した細胞は皆無であったが、大多数の細胞がビメンチンに反応を示しその反応形式も変異にとんでいた。これより結合組織由来の細胞で構成されていることが判明した。また、10%ウシ血清アルブミン含有培地下に培養を試みた顎関節滑膜は、開口障害あるいは疼痛の強い患者から得られた滑膜細胞ほど、細胞増殖が激しいことが観察された。更にこの培養細胞上清液中に含有されるTGF-β,IL-1β,IL-6値をELISAにて定量計測したが各症例間に有為差はなかった。一方、テネイシンは炎症、増殖、肥厚の激しい病的滑膜に高濃度局在し免疫組織化学的に確認できた。同じ摘出標本からテネイシンのIn-situ-hybridizationを施行したところ、テネイシンのmRNAが顎関節円板最表層特に肥厚をともなった病的滑膜に確認でき、その産生が明らかとなった。たま、線維芽細胞はIn vitroにおいてTGF-βがテネイシンの産生を調節している事実は知られているが、肥厚した滑膜内層にTGF-βとテネイシンが局在し、そのさらに内部に毛細血管新生しているのが免疫組織化学的に確認できた。

Research Products
(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Shigeyuki Fujita: "Transforming growth factor and tenascin in synovial chonclromatosis of the TMJ" Int.J.Oral Maxillofac Surg. 26. 258-259 (1997)
[Publications] Hiroaki Yoshida: "An immunohistochemical and in situhybridization study of the expression of tenascin in synovial membranes from human TMJ with internal derangement" Archi Oral Biol. 42. 1081-1085 (1996)
[Publications] Hiroaki Yoshida: "Immunohistochemical distribution of lymph capillaries and blood capillaries in the synovial membrane in the case of internal derangement of TMJ" J Oral Pathol Med. 26. 356-361 (1997)
[Publications] Hiroaki Yoshida: "The specific expression of tenascin in synovial membranes of TMJ with internal derangement" Histchemistry and Cell Biol. 107. 479-484 (1997)
[Publications] 吉田博昭: "ヒト顎関節内障の滑膜病変にともなうテネシンの特異的発現" 近畿北陸地区歯科医学大会誌. 49. 48-52 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

顎関節内障病態における関節滑膜細胞の遺伝子発現の変化についての細胞生物学的研究

Principal Investigator

藤田 茂之 京都大学, 医学研究科, 講師 (50228996)

Research Products

[Publications] Shigeyuki Fujita: "Transforming growth factor and tenascin in synovial chonclromatosis of the TMJ" Int.J.Oral Maxillofac Surg. 26. 258-259 (1997)

[Publications] Hiroaki Yoshida: "An immunohistochemical and in situhybridization study of the expression of tenascin in synovial membranes from human TMJ with internal derangement" Archi Oral Biol. 42. 1081-1085 (1996)

[Publications] Hiroaki Yoshida: "Immunohistochemical distribution of lymph capillaries and blood capillaries in the synovial membrane in the case of internal derangement of TMJ" J Oral Pathol Med. 26. 356-361 (1997)

[Publications] Hiroaki Yoshida: "The specific expression of tenascin in synovial membranes of TMJ with internal derangement" Histchemistry and Cell Biol. 107. 479-484 (1997)

[Publications] 吉田博昭: "ヒト顎関節内障の滑膜病変にともなうテネシンの特異的発現" 近畿北陸地区歯科医学大会誌. 49. 48-52 (1997)

藤田茂之京都大学, 医学研究科, 講師 (50228996)