癌抑制遺伝子による膵癌治療の基礎的研究

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08877198
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 江里口 正純 東京大学, 医科学研究所, 講師 (10114406)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 浅野 茂隆 東京大学, 医科学研究所, 教授 (50134614) ; 谷 憲三郎 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (00183864) ; 柳衛 宏宣 東京大学, 医科学研究所, 助手 (30212278)
• Keywords: Tob細胞抑制遺伝子 / p53癌抑制遺伝子 / アデノウイルスベクター / 膵癌 / 癌性腹膜炎

Research Abstract

Tobは、CDK2とCyclin Eとの反応を抑制することにより細胞周期のG1 arrestを引き起こし細胞増殖抑制効果を持つ。
ヒト膵癌細胞AsPC-1,BxPC-3,SOJについてRNAを抽出し、Northern Blottingを行い、内因性Tob遺伝子の発現を検討すると、AsPC-1,BxPC-3,SOJの順で強く発現していた。また、Western blottingを行いタンパクレベルでも同様に、内因性Tob遺伝子の発現を認めた。Tob遺伝子を組み込んだAdeno virus vector(AdCA tob)を増殖させ、ヒト膵癌細胞にtransfectさせ、増殖抑制効果を検討した。AdCA tobのtiterは3.5×10^8cpf/mlまで高めることができた。MOI20では、SOJ,AsPC-1,BxPC-3の順で増殖抑制効果を認め、Western blottingにおいて抑制効果に比例してTobタンパクの発現増強を認めた。形態的にsnescenceな変化、すなわち膨化し細胞死の状態に陥っていた。
p53癌抑制遺伝子を組み込んだAdeno virus vector(AdCMV p53)をヒト膵癌細胞にtransfectさせ、増殖抑制効果を検討した。MOI5においても、SOJ,AsPC-1,BxPC-3いずれの細胞でも増殖抑制効果を認め、強力な腫瘍抑制作用を確認した。
膵癌による癌性腹膜炎は、臨床でよく経験する治療困難な病態である。SOJ,AsPC-1膵癌細胞をヌードマウスの腹腔内に注射し、癌性腹膜炎モデルを作成した。SOJを注入すると、16日目において腸間膜に腫瘍小結節を形成した。AsPC-1を注入すると、16日目において血性腹水を伴う多数の腫瘍結節を形成した。In vitroの抑制効果を基に、In vivoにおいて癌性腹膜炎に対するAdCA tobおよびAdCMV p53の治療効果を検討中である。

Research Products

• [Publications] Yanagie H., Sumimoto H.et al: "Inhibition of human pancreatic cancer growth by the adenovirus-mediated introduction of a novel growth suppiressing gene,tob,in vitro,Cancer Gene Therapy." Proceedings of the 3rd European Conference on Gene Therapy. in press (1997)
• [Publications] Yanagie H., sumimoto H.et al: "Application of a novel growth suppressing gene,tob,for gene therapy of pancreatic cancer in vitro." The European Journal of Cancer,The European Cancer Conference,European Cancer Societies. S88 (1997)
• [Publications] Nonake Y., YanagieH.et al: "Expression of novel growth suppresing gene,TOB,in patients with esophageal cancer" The European Journal of Cancer,The European Cancer Conference,European Cancer Societies. S15 (1997)