1997 Fiscal Year Annual Research Report
ヘリコバクター・ピロリのADP-リボシル化酵素の病原性に関する共同研究
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09044322
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
平山 壽哉 長崎大学, 熱帯医学研究所, 教授 (50050696)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
MOSS Joel 米国国立衛生研究所, 部長
和田 昭裕 長崎大学, 熱帯医学研究所, 助手 (70253698)
野田 公俊 千葉大学, 医学部, 教授 (60164703)
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| Keywords | ヘリコバクター・ピロリ / ADP-リボシル化酵素 / 細菌毒素 / 病原因子 / 細菌感染症 |
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| Research Abstract |
我々は、ヘリコバクター・ピロリの菌体画分にmono-ADP-ribosyltransferase(ART)活性が存在することを示し、このARTが分子量約7万の蛋白質(P70)をADP-リボシル化することを明らかにしている。本年度は、P70のどのアミノ酸が修飾を受けているのかを検討した。
[32P]NADを基質としてP70に取り込ませた放射活性は、Hydroxylamine処理で遊離した。これは、ARTによってADP-リボシル化されたP70のアミノ酸はアルギニン(Arg)であることを示唆していた。P70をADP-リボシル化する反応液中にArgやArg類似体であるアグマチン(Agm)を加えると、濃度依存性にP70のADP-リボシル化が阻害された。P70のADP-リボシル化をほぼ90%阻害する濃度のAgm存在下では、Agm自体が強くADP-リボシル化されており、Agmを基質としてART活性を測定する方法、アグマチンアッセイが本菌のART活性を測定する際に利用できることが判った。LysateをSuperose 12カラムを用いたFLPCで分画後、得られた画分のART活性をアグマチンアッセイで測定すると、ART活性は分子量4万から8万の位置に溶出された画分に検出された。
こんご、ARTの精製を進め、精製ARTの生物活性を解明する。また、ARTを持たない変異株を作製するなどして、Tの病原性への関与を検討する。
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[Publications] Ehara, M.et al.: "Induction of fimbriated Vibrio cholerae O139." Clin.Diag.Labo.Immun.5. 65-69 (1998)
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[Publications] Yahiro, K.et al.: "Helicobacter pylorivacuolating cytotoxin binds to the 140-kDa protein in human qastric cancer cell lones,AZ-521 and AGS." Biochem.Biophys.Res.Commun.238. 629-632 (1997)
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[Publications] Oishi, K.et al.: "Nitrite reductase from Pseudomonas aeruginosa induces inflammatory cvtokines in cultured respiratory cells." Infect . Immun .65. 2648-2655 (1997)
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[Publications] Ehara, M.et al.: "Characterzation of filamentous phahes of Vibrio cholerae O139 and O1." FEMS Microbiol.Lett.152. 293-301 (1997)
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[Publications] Ohmori, N.et al.: "The enhancing effect of anionic α-helical peptide on cationic peptide-mediating transfection systems." Biochem.Biophys.Res.Commun.235. 726-729 (1997)
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[Publications] Niidome, T.et al.: "Binding of cationic α-helical peptides to plasmid DNA and their gene transfer abilities into cells." J.Biol.Chem.272. 15307-15312 (1997)
