1997 Fiscal Year Annual Research Report

細胞系列特異的因子に依存しない血球産生機構の解明

Research Project

Project/Area Number	09250212
Research Institution	Kyoto Prefectural University of Medicine
Principal Investigator	薗田精昭京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60206688)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	木村貴文京都府立医科大学, 医学部, 助手 (30275193) 横田昇平京都府立医科大学, 医学部, 助手 (80231687)
Keywords	造血幹細胞 / 造血シグナル / gp130 / c-kit / IL-3 / IL-6 / 可溶性IL-6受容体 / セルソーター
Research Abstract	ヒト末梢血、臍帯血よりnull細胞を分離し、CD34とIL-6Rに対するモノクローナル抗体で二重染色後、セルソーターを用いてCD34^+IL-6R^<+Or->分画を得た。これらの細胞を標的として、IL-6,IL-11,LIF,OSM,CNTF,CT-1などに共通なシグナル伝達分子であるgp130を介する造血シグナルの解明を行った。これまでの検討で、gp130を介するシグナル単独では幹細胞に対して有意な作用を示さないが、c-kitあるいはIL-3Rを介するシグナルを同時に活性化することにより、G-CSF,Epo,TPOなどの細胞系列特異的因子非依存性に3系統の成熟血球を誘導できることを見い出した。IL-3Rを介するシグナルは幹細胞の生存や初期の増殖に必須であり、一方、SCFはIL-3の存在下で幹細胞の増殖を促進した。gp130を介するシグナルは、主に成熟因子として作用した。このgp130のシグナルで誘導される赤血球、巨核球の成熟度に関して、GPAやCD41の発現レベルあるいは巨核球のploidyを指標として生理的成熟因子であるEpo,TPOと比較したところ、質的に明らかに劣っていた。現在、c-kit,IL-3R,gp130を介するシグナル間のクロストークについて詳細に検討するために、Jak-Stakシグナル伝達路やMAPキナーゼカスケードに存在するシグナル伝達分子に対するアンチセンスDNA分子(オリゴS)を合成し、キ-シグナルの検出を行っている。gp130を介するシグナルは、特に赤血球系幹細胞の増幅、増殖、分化に有用であることから、末梢血、臍帯血より得られたCD34^+IL-6R^<+or->細胞を標的細胞として幹細胞のex vivo増幅にも着手している。その結果、pg130を介するシグナルが、IL-3R,c-kit,fit3,c-Mplを介するシグナルと協調的に作用し、CFU-GM,BFU-E,CFU-Mix,CFU-Megを最高300倍程度まで増幅することも明らかにしている。今後は、自己再生能に重点を置いて骨髄ストローマ細胞との共培養系におけるLTC-ICを測定することにより、gp130を介するシグナル未分化幹細胞に対する作用についても検討を加えていく予定である。

Research Products

(11 results)

All Other

All Publications (11 results)

[Publications] Sakabe H et al.: "Human cord blood-darived primitive progenitors are enriched in CD34+c-kit- cells" Leukemia. (in press). (1998)
[Publications] Sakabe H et al.: "Haematopoietic action of flt3 ligand on cord blood-derived CD34-positive cells expressing different---" Eur J Haematol. (in press). (1998)
[Publications] Kimura T et al.: "Simultaneous activation of signals through gp130,c-kit,and interleukin-3 receptor promotes a trilineag" Blood. 90 (12). 4767-4778 (1997)
[Publications] Tanimukai S et al.: "Recombinant human c-Mpl ligand (thrombopoietin) not only acts on megakaryocyte progenitors,but also ---" Exp Hematol. 25. 1025-1033 (1997)
[Publications] Sonoda Y et al.: "Human flt3 ligand acts on myeloid as well as multipotential progenitors derived from purified ---" Eur J Haematol. 58. 257-264 (1997)
[Publications] Sonoda Y et al.: "Action of human interleukin-4 and stem cell factor on erythroid and mixed colony formation by ---" Br J Haematol. 96. 781-789 (1997)
[Publications] Ohmizono Y et al.: "Thrombopoietin augments ex vivo expansion of human cord blood-derived hematopoietic progenitors------" Leukemia. 11. 524-530 (1997)
[Publications] Sakabe H et al.: "Functional differences between subpopulations of mobilized peripheral blood-derived CD34+ cells---" Stem Cells. 15. 73-81 (1997)
[Publications] Sonoda Y et al.: "Characterization of peripheral blood stem cells" Jpn J Apheresis. 16 (1). 44-49 (1997)
[Publications] Inoue K et al.: "Aberrant overexpression of the Wilms tumor gene (WTl) in human leukemia" Blood. 89 (4). 1405-1412 (1997)
[Publications] Yokota S et al.: "Internal tandem duplication of the flt3 gene is preferntially seen in acute myeloid leukemia ---" Leukemia. 11. 1605-1609 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

細胞系列特異的因子に依存しない血球産生機構の解明

Principal Investigator

薗田 精昭 京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60206688)

Research Products

[Publications] Sakabe H et al.: "Human cord blood-darived primitive progenitors are enriched in CD34+c-kit- cells" Leukemia. (in press). (1998)

[Publications] Sakabe H et al.: "Haematopoietic action of flt3 ligand on cord blood-derived CD34-positive cells expressing different---" Eur J Haematol. (in press). (1998)

[Publications] Kimura T et al.: "Simultaneous activation of signals through gp130,c-kit,and interleukin-3 receptor promotes a trilineag" Blood. 90 (12). 4767-4778 (1997)

[Publications] Tanimukai S et al.: "Recombinant human c-Mpl ligand (thrombopoietin) not only acts on megakaryocyte progenitors,but also ---" Exp Hematol. 25. 1025-1033 (1997)

[Publications] Sonoda Y et al.: "Human flt3 ligand acts on myeloid as well as multipotential progenitors derived from purified ---" Eur J Haematol. 58. 257-264 (1997)

[Publications] Sonoda Y et al.: "Action of human interleukin-4 and stem cell factor on erythroid and mixed colony formation by ---" Br J Haematol. 96. 781-789 (1997)

[Publications] Ohmizono Y et al.: "Thrombopoietin augments ex vivo expansion of human cord blood-derived hematopoietic progenitors------" Leukemia. 11. 524-530 (1997)

[Publications] Sakabe H et al.: "Functional differences between subpopulations of mobilized peripheral blood-derived CD34+ cells---" Stem Cells. 15. 73-81 (1997)

[Publications] Sonoda Y et al.: "Characterization of peripheral blood stem cells" Jpn J Apheresis. 16 (1). 44-49 (1997)

[Publications] Inoue K et al.: "Aberrant overexpression of the Wilms tumor gene (WTl) in human leukemia" Blood. 89 (4). 1405-1412 (1997)

[Publications] Yokota S et al.: "Internal tandem duplication of the flt3 gene is preferntially seen in acute myeloid leukemia ---" Leukemia. 11. 1605-1609 (1997)

薗田精昭京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60206688)