1997 Fiscal Year Annual Research Report
フォークヘッドドメイン遺伝子LUNの肺発生、肺分化、肺発癌における役割について
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09254202
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| Research Institution | Akita University |
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Principal Investigator |
三浦 直行 秋田大学, 医学部, 助教授 (40165965)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田 進昭 大阪府立母子保険医療センター研究所, 免疫部門, 部長 (10250341)
寺田 邦彦 秋田大学, 医学部, 講師 (60197796)
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| Keywords | フォークヘッド遺伝子 / LUN / 肺腺癌 / 細気管支上皮 / II型肺胞細胞 / サーファクタント蛋白 / ノックアウトマウス / HFH8 |
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| Research Abstract |
申請者の単離したフォークヘッド遺伝子LUNは、主に肺に発現していることはわかっていたが、今回さらに肺内における分布をin situ ハイブリ法を用いて詳しく検討した。その際、サーファクタント蛋白CをII型肺胞細胞のマーカーとして平行染色を行い、より正確を期した。その結果、LUN遺伝子は細気管支上皮細胞とII型肺胞細胞に発現していることが明らかになった。これらの細胞は肺腺癌の発生母地であることを考えあわせると、LUN遺伝子と発癌の関係が重要になってくる。そこで、ヒト肺腺癌細胞株A549細胞におけるLUN遺伝子の発現をノーザン解析およびLUN遺伝子のプロモーター活性解析を行ったところ、A549細胞ではLUN遺伝子が発現していることが明らかになった。
また、類似遺伝子HFH8が小腸にも発現していることから、小腸における発現をノーザン解析したところ、LUN遺伝子は肺よりは弱いが小腸にも発現していることが判明した。
肺の発生、分化、発癌におけるLUN遺伝子の役割を検討するために、LUN遺伝子のノックアウトマウスを作製しつつある。LUN遺伝子部位にNeo遺伝子を入れたコンストラクトを作製し、これをES細胞に遺伝子導入して一方のLUN遺伝子が破壊されたES細胞クローンを20個得た。これをマウス肺盤胞に微小注射してキメラマウス雄を13匹得た。現在、野生型のB6マウス雌と交配させヘテロマウスを作成中である。ノックアウトマウスはLUN遺伝子の肺発生、分化、発癌における役割を明らかにしてくれることが強く期待できる。
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[Publications] Yasui,O.: "Isolation of oval cells from Long-Evans Cinnamon rats and their transformation into hepatocytes in vivo in the rat liver." Hepatology. 25. 329-334 (1997)
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[Publications] Miura,N.: "Isolation of the mouse(MFH-1)and human(FKHL14)Mesenchyme Fork Head-1 genes reveals conservation of their gene and protein structures." Genomics. 41. 489-492 (1997)
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[Publications] Yang,X-L.: "Two forms of Wilson disease peoteins produced by alternative splicing are localized in distinct cellular compartments." Biochem.J.326. 897-902 (1997)
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[Publications] Iida,K.: "Essential roles of the winged helix transcription factor MFH-1 in aortic arch patterning and skeletogenesis." Development. 124. 4627-4638 (1997)
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[Publications] Terada,K.: "Restoration of holoceruloplasmin synthesis LEC rat after infusion of recombinant adenovirus bearing WND cDNA." J.Biol.Chem.273. 1815-1820 (1998)
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[Publications] Miura,N.: "Mouse forkhead(winged helix)gene LUN encode a transactivator that acts in the lung." Genomics. (in press).
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[Publications] 三浦直行: "ノックアウトマウス・データブック" 中山書店, 564 (1997)
