1997 Fiscal Year Annual Research Report

白血病細胞の分化により発現する新規SLAPと分化制御の解析

Research Project

Project/Area Number	09254254
Research Institution	Jichi Medical University
Principal Investigator	畠清彦自治医科大学, 医学部, 助教授 (80192699)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	池田正幸森永乳業生物科学, 副主任研究員照井康仁自治医科大学, 医学部, 講師 (10285786) 冨塚浩自治医科大学, 医学部, 講師大月哲也自治医科大学, 医学部, 助手 (60275691)
Keywords	分化誘導 / retinoic acid / SLAP(Src-like adaptor protein) / アポトーシス / 内皮型IL-8
Research Abstract	白血病株細胞U937に、分化誘導療法のretinoic acid(RA)を曝露することによって出現する遺伝子を、differeutial display法でクローニングしたところSLAP(Src-like adaptor protein)であった。以下の点を明らかにした。 1.SLAP遺伝子を大腸菌で発現、精製し、ポリクローナル抗体を作成した。 2.SLAP遺伝子のstable transformant作成を試みたところ、核は巨大化して多核となり細胞はアポトーシスを誘導し、線維肉腫株細胞でも認められた。抗体はウエスタンで作動する系が確立できた。 3.分化誘導中にアポトーシスに陥ることから、この作用機構についても解析した。白血病細胞株自身がアポトーシス誘導因子を産生していることがわかった。精製し、蛋白のN末端アミノ酸配列分析を行い、同定した。マウスに白血病細胞を移植して、この因子を注射したところアポトーシス誘導がおこり、腫瘍も縮小した。臨床例でも解析したところinvitroでは誘導された。作用する新たな分子とSLAPとの関係についても研究が必要である。 SLAP遺伝子は全長を遺伝子導入すると、細胞がアポトーシスをおこす事から、遺伝子に変異を入れたものの樹立を試みる必要がある。現在進行中である。アポトーシスに陥る白血病株細胞は培養上清中にアポトーシスを誘導する因子が産生されており、精製したところ内皮型IL-8であると同定された。現在作用機序について研究中であり、臨床応用及びSLAPとの関係について研究を進めたい。

Research Products

(10 results)

All Other

All Publications (10 results)

[Publications] Ohtsuki T, Hatake K, et al.: "Expression of Src-like adapter protein mRNA is induced by all-trans retinoic acid." Biochem.Biophys. Res.Comm.230. 81-84 (1997)
[Publications] Ohya K, Hatake K, et al.: "SOCS-1/JAB/SSI-1 can bind to and suppress Tec protein-tyrosine kinase." J.Biol.Chem.272. 27178-27182 (1997)
[Publications] Yamashita Y, Hatake K, et al.: "Tec and JAK2 kinases cooperate to mediate cytokine-driven activation of c-fos transcription" Blood. (in press). (1997)
[Publications] Yamada M,Hatake K, et al.: "Properties of murine stroma induced by M-CSF." J.Cell Physiol.173. 1-9 (1997)
[Publications] Shimura M, Hatake K, et al.: "Characterzation of room temperature induced apoptosis in HL-60." FEBS Lett.417. 379-384 (1997)
[Publications] Kasahara T, Hatake K, et al.: "IL-8 and MCP-1 production by a human gliobtastoma cell line,T98G in coculture with monocytes : Requirement of mococytes-associated IL-la." Eur Cytokine Net. (in press). (1998)
[Publications] Tomizuka H, Hatake, et al.: "CD95 predicts responsiveness to tretinoin in acue promyelocytic leukemia." Int J Mol Med. 1. 207-11 (1998)
[Publications] Hatake, et al.: "Apoptosis-gene expression in hematopioetic system : Normal and pathological conditions." Int J Mol Med. 1. 121-129 (1998)
[Publications] Terui Y, Hatake, et al.: "Rcl-X Is a Regulatory Factor of Apoptosis and Differentiation in Megakaryocytic Lineage Cells." Exp.Hematol.(in press). (1998)
[Publications] Terui Y, Hatake, et al.: "Identification of a novel apoptosis-inducing factor derived from leukemic cells : Endothelial interleukin-8,but not monocyte-derived,induces apoptosis in leukemic cells." Biochem.Biophy.Res.Comm.(in press). (1998)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

白血病細胞の分化により発現する新規SLAPと分化制御の解析

Principal Investigator

畠 清彦 自治医科大学, 医学部, 助教授 (80192699)

Research Products

[Publications] Ohtsuki T, Hatake K, et al.: "Expression of Src-like adapter protein mRNA is induced by all-trans retinoic acid." Biochem.Biophys. Res.Comm.230. 81-84 (1997)

[Publications] Ohya K, Hatake K, et al.: "SOCS-1/JAB/SSI-1 can bind to and suppress Tec protein-tyrosine kinase." J.Biol.Chem.272. 27178-27182 (1997)

[Publications] Yamashita Y, Hatake K, et al.: "Tec and JAK2 kinases cooperate to mediate cytokine-driven activation of c-fos transcription" Blood. (in press). (1997)

[Publications] Yamada M,Hatake K, et al.: "Properties of murine stroma induced by M-CSF." J.Cell Physiol.173. 1-9 (1997)

[Publications] Shimura M, Hatake K, et al.: "Characterzation of room temperature induced apoptosis in HL-60." FEBS Lett.417. 379-384 (1997)

[Publications] Kasahara T, Hatake K, et al.: "IL-8 and MCP-1 production by a human gliobtastoma cell line,T98G in coculture with monocytes : Requirement of mococytes-associated IL-la." Eur Cytokine Net. (in press). (1998)

[Publications] Tomizuka H, Hatake, et al.: "CD95 predicts responsiveness to tretinoin in acue promyelocytic leukemia." Int J Mol Med. 1. 207-11 (1998)

[Publications] Hatake, et al.: "Apoptosis-gene expression in hematopioetic system : Normal and pathological conditions." Int J Mol Med. 1. 121-129 (1998)

[Publications] Terui Y, Hatake, et al.: "Rcl-X Is a Regulatory Factor of Apoptosis and Differentiation in Megakaryocytic Lineage Cells." Exp.Hematol.(in press). (1998)

[Publications] Terui Y, Hatake, et al.: "Identification of a novel apoptosis-inducing factor derived from leukemic cells : Endothelial interleukin-8,but not monocyte-derived,induces apoptosis in leukemic cells." Biochem.Biophy.Res.Comm.(in press). (1998)

畠清彦自治医科大学, 医学部, 助教授 (80192699)