1997 Fiscal Year Annual Research Report
色素性乾皮症A群マウスを用いたリポゾーム遺伝子治療の試み
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09255223
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
錦織 千佳子 京都大学, 医学研究科, 助手 (50198454)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松吉 徳久 京都大学, 医学研究科, 助手 (10263071)
八木 孝司 京都大学, 医学研究科, 助教授 (80182301)
武部 啓 京都大学, 医学研究科, 教授 (10028318)
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| Keywords | 色素性乾皮症 / リポゾーム / T4エンドヌクレアーゼ / ポリミジンダイマー / 遺伝子治療 / (6-4)光産物 |
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| Research Abstract |
色素性乾皮症(XP)は紫外線によってDNAに生じた傷を修復する酵素を欠損するために、日光露光部に皮膚癌を生じる高発癌性遺伝疾患である。XPは常染色体性劣性遺伝疾患であり、その遺伝子欠損を補う遺伝子治療を適用することが、根本治療法となる可能性が高い。XPA遺伝子をリポゾームを用いて導入することを最終目的として、それに必要な基礎実験としてピリミジンダイマーを特異的に修復する酵素であるT4EndonucleaseVを、HVJリポゾームに包埋したT4endoV-HVJリポゾームの有用性を調べた。ピリミジンタイマーに特異的なモノクローナル抗体(TDM2)並びに、(6-4)CT光産物に特異的なモノクローナル抗体(64M2)によって細胞核内のそれらのDNA傷害並びにその修復動態を検出した。XPA群細胞に紫外線(UVB200J/m^2またはUVC20J/m^2)照射直後にT4endoV-HVJリポゾームを1時間処理した群では、処理をしない群と比較してTDM2抗体に対する染色性が、明らかに減少し、64M2抗体に対する染色性に変化はなかったことから、T4endoV-HVJリポゾーム処理により細胞内にT4endonucleaseVがは入ることによってピリミジンダイマーのみが特異的に修復されたことが明らかになった。リポゾームの処理時間は、30分ではその効果は低く、1時間以上であれば十分の修復効果があった。HVJリポゾームの細胞傷害性は、1-2時間処理では問題なく、18時間処理では、細胞の形態はかなり乱れた。処理時間は1-2時間が適当と考えた。HVJリポゾームの有用性、最適な処理方法が碓立されたので今後はXPA蛋白をHVJリポゾームに包埋して、紫外線照射後のXPAマウス並びにXPAマウス表皮細胞を用いてその有用性を碓認したい。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Morita K: "Werner's syndrome-chromosomal analysis of cultured fibroblasts and mitogen-stimulated lymphocytes" Brit.J.Dermal. 136. 620-623 (1997)
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[Publications] Chikako Nishigori: "Clinlcal characteristics and gene alterations in XPF gene in Japanese Fatients with xeroderma pigmentosum Group F" Photomedicine and Photobiology. 19. 43-44 (1997)
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[Publications] Takashi Yagi: "Complete restration of normal DNA repair characteristics in Group F xeroderma pigmentosum cells by over-expression of transfected XPF cDNA" Carcinogensis. 19. 55-60 (1998)
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[Publications] Matsumura Y.: "Mutations of P16/P15 Tumor Suppressor Genes and Replication Error Contribute Independently to the Pathogenesis of Sporadic Malignant Melanoma" Arch.Dermatol.Res. (印刷中).
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[Publications] Matsumura Y: "Chatacterization of molecular defects in xeroderma pigmentosum group F in relation to its clinically mild symptoms." Hum.Mol.Genet. (印刷中).
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[Publications] Miho Matsui: "Proceedings for the 10th Japan-Korea joint meeting...of Dermatology" The oxidative stress and the arsenic-induced Bowen's Disease, 4 (1997)
